泥鳅体表粘液多糖诱导SGC—7901细胞凋亡机理研究.pdf

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1、研究与讨ScienceandTechnologyFoodIndustry泥鳅体表粘液多糖诱导SGC一7901细胞凋亡机理研究吴穹，许晓曦(东北农业大学，黑龙江哈尔滨150030)摘要：探讨泥鳅体表粘液多糖(PML)对人胃癌SGC一7901细胞凋亡作用和机制。采用Sevege法对PML进行分离、纯化，用紫外分光光度法、凝胶色谱法和高效液相色谱法对其鉴定后作用于SGC一7901细胞中。采用MITI'法鉴定PML对该细胞的抑制作用，光显下观察细胞形态结构变化，流式细胞术检测细胞周期及凋亡，WesternBlot

2、检测Bax、Bcl一2蛋白表达变化。结果表明，用Sevege法提取PML纯度高、成分单一。MTr法，10~2701xmLPML处理SGC一7901细胞24、48、72h，抑制作用随PML浓度和时间增加而逐渐增强。流式细胞术检测细胞凋亡，凋亡率随PML浓度和作用时间增加而逐渐增高。WesternBlot检测，细胞经10-270I,Zg／mLPML处理24、48h后Bcl一2和Bax蛋白表达随浓度和时间增加分别增强和减少，说明PML对SGC一7901细胞凋亡有促进作用，其机理与对Bcl一2与Bax基因的调控有

3、关。关键词：泥鳅体表粘液多糖，细胞凋亡，Bcl一2，BaxExperimentalstudyontheapoptosisofSGC-7901inducedbysurfacemucuspOlysaccharOSeofloachwUQiong．xuXiao—xi(NortheastAgricuhuralUniversity，Harbin150030，China)．Abstract：Theapoptosiseffectandmechanismsofthesurfacemucusp0IysaccharideofI

4、oach(PML)onhumangastriccancerSGC一7901cellwereexplored．PMLwasisolatedandpurifiedbySevege．andwasidentifiedbyultravioletspectrophotometry，gelchromatographyandhighperformanceliquidchromatographybeforeactingtheroleinSGC一7901cel1．1dentifiedtheinhibitiveeffectof

5、PMLonSGC一7901cellbyMTT．observedchangesIncelImorphologyusingopticalmicroscope，detectedcellcycleandapoptosisbyflowcytometry，anddetectedchangesofBax，Bcl一2proteinexpressionbyWesternBlot．TheresultsshowedthatitwashighpurityandsinglecompositiontoextractPMLbySeve

6、ge．TheinhibitiongraduallyincreasedwiththeincreaseinconcentrationofPMLandtimewhentheSGC一7901cellsweretreatedwith10～270pg／mLofPMLfor24。48，72h．TheflowcytometryshowedthattheapoptosisrategraduallyincreasedwiththeIncreaseInconcentrationofPMLandtime．Westernblold

7、etectionindicatedthatBcI一2andBaxproteinexpressionenhancedandreducedrespectivelywiththeincreaseinconcentrationofPMLandtimeafterthecellprocessingoflO-270pg／mLofPMLfor24and48h．whichexplainedthatPMLcouldpromotetheapoptosisofSGC一7901cellsandthemechanismwasrela

8、tedtogeneregulationofBcl-2andBax．Keywords：mucuspOIysacchar0se；apoptosis；Bcl一2；Bax中图分类号：TS201．2文献标识码：A文章编号：1002—0306(2012)19—0124—04多糖及其缀合物对多种危害人类健康的疾病，研究与开发已日益引人注目。胃癌是威胁人类生命如免疫紊乱、癌症、糖尿病、高血压、肝炎、血栓等都健康最常见的恶性肿瘤之一，在我国其发