吴茱萸碱对胃癌sgc-7901细胞生长抑制及凋亡诱导作用的研究

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1、《中国图书资料分类法》单位代码：10660分类号：R730.52学号：S090085贵阳医学院2012届硕士学位论文吴茱萸碱对胃癌SGC-7901细胞生长抑制及凋亡诱导作用的研究研究生：杨丽导师：黄海副教授年级：2009级专业：临床检验诊断学2012年5月8日贵阳医学院2012届硕士研究生论文目录摘要…………………………………………………………2前言…………………………………………………………4材料与方法……………………………………………………5结果…………………………………………………………17讨论…………………………………………………………28参考文献

2、………………………………………………………31英文摘要………………………………………………………33致谢…………………………………………………………35略缩词表………………………………………………………36论文原创性声明………………………………………………37附：综述……………………………………………………38-1-贵阳医学院2012届硕士研究生论文吴茱萸碱对胃癌SGC-7901细胞生长抑制及凋亡诱导作用的研究专业：临床检验诊断学研究生：杨丽导师：黄海副教授摘要【目的】研究吴茱萸碱对胃癌SGC-7901细胞增殖和凋亡的影响，并探讨相关的作用机制，从而为吴茱

3、萸碱的抗癌作用提供进一步的实验依据，为其开发成为临床癌症治疗中的一种新型药物提供理论基础。【方法】体外培养人胃癌SGC-7901细胞，1.5μmol/l吴茱萸碱作用于SGC-7901细胞12h、24h、36h、48h后：①倒置显微镜和荧光显微镜下观察细胞形态学的变化。②PI单染流式细胞术检测细胞周期分布情况。③AnnexinV-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡情况。④采用caspase活性测定试剂盒检测细胞中caspase3、caspase8和caspase9的活性。⑤WesternBlot检测细胞中caspase3、caspase8、caspas

4、e9、Bax、Bcl-2的表达情况。【结果】①倒置显微镜和荧光显微镜下观察，经吴茱萸碱作用的胃癌SGC-7901细胞表现出典型的细胞凋亡形态学特征。②PI单染结果显示，吴茱萸碱影响了胃癌SGC-7901细胞周期分布，使细胞周期阻滞于G2/M期。③AnnexinV-FITC/PI双染结果显示，吴茱萸碱诱导了胃癌SGC-7901细胞凋亡。④比色法检测caspase活性结果显示，吴茱萸碱作用24h、36h后，胃癌SGC-7901细胞中caspase3、caspase8和caspase9的活性均增高。⑤WesternBlot检测结果显示，吴茱萸碱作用24h、36h

5、，胃癌SGC-7901细胞中caspase3、caspase8、caspase9和bax的表达量均增加。吴茱萸碱作用12h、24h时，bcl-2的表达量增加；吴茱萸碱作用36h、48h时，bcl-2的表达量降低。【结论】吴茱萸碱通过使细胞周期阻滞于G2/M期抑制了胃癌SGC-7901细胞的增殖，同时当吴茱萸碱作用一定时间后，可引起caspase3、caspase8和caspase9活性的增强，增加caspase3、caspase8和caspase9的蛋白表达，增加bax的蛋白表达，降低bcl-2的蛋白表达从而诱导了胃癌SGC-7901细胞的凋亡。-2-贵阳

6、医学院2012届硕士研究生论文关键词：吴茱萸碱；胃癌SGC-7901细胞；生长抑制；凋亡；周期-3-贵阳医学院2012届硕士研究生论文前言吴茱萸是芸香科植物吴茱萸等的干燥近成熟果实，是一种用来治疗头痛，腹[1]痛，产后出血，痢疾和闭经等的传统中草药。吴茱萸碱是从吴茱萸中分离出的最主要的、具有生物活性的吲哚喹啉类生物碱。吴茱萸碱已被证明具有多种生物[1]效应，如镇痛，抗炎，抗肥胖，舒张血管，调节温度和收缩子宫等效应。研究表明，吴茱萸碱在体内和体外均具有抗癌活性，其主要是通过诱导肿瘤[2]细胞凋亡、阻遏细胞周期和抑制肿瘤组织侵袭及转移起作用。关于吴茱萸碱抗癌作

7、用及相关机制的研究也成为近年来的研究热点。目前国内外研究已表明吴茱[3][4-6][7][8-10][11]萸碱能够抑制白血病，恶性黑色素瘤，甲状腺癌，前列腺癌，乳腺癌,[12,13][14][15-17][18]肝癌，子宫颈癌，大肠癌，胰腺癌等人类癌细胞株的增殖。肿瘤不仅是细胞增殖异常和分化异常的疾病，同时也是凋亡异常的疾病。目前细胞凋亡及其机制的研究为我们攻克肿瘤提供了新的思路——肿瘤的治疗可以通过诱导肿瘤细胞的死亡，而不是抑制肿瘤的增殖而达到。因此，采用用各种方法诱导细胞凋亡或最佳诱导条件的研究将具有重要意义。胃癌是我国最常见的恶性肿瘤之一，胃癌死亡

8、率居恶性肿瘤首位，化疗是治疗胃癌的主要手段之一。目前关于吴茱萸碱对