多西紫杉醇对人胃癌细胞的抑制及诱导凋亡作用的研究

《多西紫杉醇对人胃癌细胞的抑制及诱导凋亡作用的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、东南大学硕士学位论文多西紫杉醇对人胃癌细胞的抑制及诱导凋亡作用的研究中文摘要研究生王彩莲导师陈宝安学校东南大学目的本课题旨在研究多西紫杉醇对人胃腺癌(MKX一45)细胞的生长抑制作用及诱导人胃腙癌细胞凋亡作用，并对其诱导凋亡的机制作初步的研究。方法常舰培养人胃腺癌MKN一45细胞株，采用MTT法(四甲基偶氮唑蓝比色法)测定细胞增殖抑制率；流式细胞(FCMFlowCytometry)技术检测细胞周期分御和凋1L率；应用电镜观察细胞凋亡的形态特点：采用荧光光度检测法测定细胞内Caspases(cysteinyt—aspa

2、rtic—acid—proteases)酶的活性。结果1．多西紫杉醇在1．25ug／ml一80ug／ml浓度范围内对MKN一45细胞株有抑制增殖作用，并且与药物浓度呈正相关。2．终浓度为20ug／ml的多西紫杉醇作用于MKN一45细胞3小时和6小时，流式细胞检测未见有凋亡峰的出现，作用8小时有凋亡峰的出现，12小时凋产率接近50％。3．以20ug／ml的多西紫杉醇诱导MKN一45细胞凋亡3小时和6小时与未加药的对照组比较，可见MKN-45细胞周期被阻滞在G2／M期，S期比例减少。4．多西紫杉醇lOug／ml作用MKN

3、一45细胞24小时，流式细胞检测未见有明显的凋亡峰的出现。5．在凋亡的形态学检测时发现，浓度为20ug／ml的多西紫杉醇作用MKN一45细胞12小时，可见典型的捌亡形态学改变。6．多西紫杉醇浓度在5ug／ml一80ug／ml范围内作用MKN一45细胞，10小时可诱导Caspases转变为活性状态，且Caspases的活性与干预的药物浓度成J下相关。结论新一代的紫杉类抗癌药物多西紫杉醇可以抑制人胃腺癌MKN一45细胞增殖，诱导MKN一45细胞凋亡，诱导Caspases酶由失活状态转变为活化状态。关键词人胃腺癌细胞株(M

4、KN-45)多西紫杉醇细胞增殖抑制细胞凋亡多西紫杉醇对人胃癌细胞的抑制及诱导凋亡作川的研究ThestudyoftheinhibitsandapoptosisinducedbydocetaxeltohumangastriccancercellSAbstractPostgraduate：WangCai—IianDirector：ChenBao—anUniversity：SouthEastUniversityObjective：TheprojectiStostudy(：pI1S(MKN45)andapoptosiSindu

5、cedbymechanismininducjngapoptosiS．theeffectofinhibitonhumangasLriCDocetaxe]inhumangastriccel1Sand1tSMethods：RoutinecellculturetechniqueiSusedteculturehumangastriCcancelcel]S(MEN45)．MTTiSusedtodetecttheinhibitofce]1proliferation：FCMiSusedlOtesteellphasesdistribu

6、tionandtheratioofapoptosiS：glectroniCmicroscopeiSusedtoobservetheeonfigurationofcellapoptosiS：andfluorimetriCassaylSuesdtomeasuretheactjVityofCaspaseswithince】1S．Results：1．’[heeffectivedosesofDocetaxeltoinhibittheproliferationofhumangastriCCancerca]1s(MKN一45)iS

7、withinarangeof1．25ug／mlto80ug／ml：andiScorrelatedpositivelywithdosage．2．FCMtestshowsnoapoptosiSpeakafter3hto6h，butapoptosiSpeakafter8hwiththefinaldosageofDocetaxelat20ug／m]．’therali0OrapetosiSiSC]oseto50％in12h．3．Comparedwiththecontrol，thearrestoCeel1phase{Sseena

8、tphaseG2／Mafterinducedfor3hto6hwiththedosageofDocetaxe]at20ug／mlandtheratioofSphaseisdecreased．4．FCMtestshows[10obviOUSapoptosispeakwithadosageofDocetaxelatlOug／mltoinducehu