资源描述：
《胸腺内注射异基因骨髓细胞对大鼠异位心脏移植影响的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、第22卷第4期 大连医科大学学报Vol.22,No.42000年12月 JournalofDalianMedicalUniversityDec.2000文章编号:1000-5676(2000)04-0254-04胸腺内注射异基因骨髓细胞对大鼠异位心脏移植影响的研究1X12232任淑华,王井伟,刘长宏,张东明,赵雅莉,吕树梁(11唐山工人医院胸心外科,河北唐山 063000;21大连医科大学第二临床学院胸心外科,辽宁大连 116027;31北京医科大学病理生理学教研室,北京100083)摘要:本文采用同种大鼠颈部异位心脏移植模型研究受体胸腺内注射异基因骨髓细胞对移植心脏存活时间的影响及免
2、疫学功能变化。实验分4组。对照组(Control组)、环磷酰胺组(CP组)、单纯胸腺内注射异基因骨髓细胞组(IT组)、胸腺内注射异基因骨髓细胞辅以短期环磷酰胺组(IT+CP组)。结果显示:移植心脏存活时间最长的是IT+CP组为6813±1314d,CP组移植心脏存活时间为1813±214d,两组间移植心脏存活时间差异显著(P<0101),而二者分别与Control组比较差异显著(P<0101,P<0105),Control组、IT组移植心脏存活时间较短,分别为815±114d、718±112d,受体接受实验处理因素1个月后免疫功能测定表明:各组大鼠脾细胞的淋巴细胞转化试验无明显差异(P
3、>0105)。IT+CP组大鼠脾细胞对供体脾细胞的单向混合淋巴细胞培养有明显抑制作用(P<0101),对供体靶细胞的细胞介导的细胞毒试验呈明显抑制作用(P<0101),说明受体对供体产生特异性免疫无反应性,即免疫耐受。关键词:胸腺内注射;骨髓细胞;心脏移植;免疫耐受中图分类号:R65412 文献标识码:A 器官移植作为器官功能衰竭终末期病人唯一的分别为供、受体,由沈阳中国医科大学实验动物中有效的治疗手段,其临床应用受到免疫排斥反应的心提供。严重制约。80年代初,由于环孢素A的临床应用,112 受体处理方法及实验设计明显提高了心、肝、肾等器官移植的一年存活率,实验动物随机分4组,每
4、组6只。A组:受体但长期应用免疫抑制剂会使机体免疫功能低下,感胸腺内注身RPMI1640培养液011ml,简称Control染和恶性肿瘤发生率明显增高,严重影响了病人长组;B组:受体腹腔注身环磷酰胺120mg/kg,简期生存,并降低了他们的生活质量。诱导受体对供称CP组;C组:受体胸腺内注射供体骨髓细胞011体器官特异性免疫无反应性是解决上述问题的最理ml,简称IT组;D组:受体胸腺内注射供体骨髓想途径,本文采用胸腺内注射异基因骨髓细胞辅以细胞011ml,同时受体腹腔内注射环磷酰胺120短期免疫抑制剂诱导了成年大鼠心脏移植物的特异mg/kg,简称IT+CP组。以上各组供体为Wistar
5、大性耐受。鼠,受体为SD大鼠,受体行心脏移植的同时接受上述处理因素。1 材料和方法[1]113 骨髓细胞制备111 动物取2只Wistar大鼠,颈椎脱臼处死。用75%酒健康雄性Wistar、SD大鼠,体重200～300g,精消毒全身,各取2根股骨,用含RPMI1640(pH712)X通讯作者:河北省唐山市工人医院胸心外科,电话:0315-2821821-2213第4期任淑华等∶胸腺内注射异基因骨髓细胞对大鼠异位心脏移植影响的研究255的注射器在无菌培养皿中冲出4根股骨骨髓腔的全116 免疫抑制剂部骨髓细胞,用吸管吹打数次,再通过4号针头制成环磷酰胺临用时以生理盐水稀释成20mg/ml,
6、单细胞悬液,1000r/min离心10min,弃上清,沉淀按120mg/kg在手术当日腹腔内注入。9用RPMI1640液调细胞浓度至1×10个/ml,2%台117 移植心脏存活时间的判定盼蓝染色,骨髓细胞活性在95%以上。由于失血、麻醉并发症,移植术后24h受体114 心脏移植死亡为手术失败,不包括在分析之内。移植心脏通采用cufftechmique,移植心存活大于3个月为过每天触摸决定生存与否,不能触及时,可行心电长期存活。图判断,触摸移植心跳停止或受体动物死亡,为排[1]115 受体胸腺内注射供体骨髓细胞斥反应终点。胸腺暴露采用胸骨正中部分切开术式。行颈部1184组受体SD大鼠接受
7、实验处理因素1个月后异位心脏移植术后的受体,在原颈部切口的基础上,进行免疫功能测定。暴露胸骨,切开胸骨达胸骨角,钝性分离舌骨下肌群分别采用MTT法行淋巴细胞转化试验、单相达气管前筋膜,提拉气管前筋膜即可见胸腺上极,用混合淋巴细胞培养试验、淋巴细胞介导的细胞毒试5号皮试针向胸腺左、右两叶各注入供体骨髓细胞验检查。80105ml(共含细胞数1×10个),待胸腺两叶均匀肿2 结果胀后,缓慢抽出针头,再缝合舌骨下肌群及浅、深筋膜,间断缝合切口。本方法抗
