内异康复栓对大鼠异位子宫内膜细胞凋亡基因bcl

《内异康复栓对大鼠异位子宫内膜细胞凋亡基因bcl》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、内异康复栓对大鼠异位子宫内膜细胞凋亡基因Bcl【摘要】目的探讨内异康复栓对大鼠异位子宫内膜细胞相关凋亡基因Bcl2/Bax蛋白的影响。方法建立大鼠子宫内膜异位症模型，取各组异位子宫内膜组织固定、切片，采用免疫组化法检测凋亡相关基因Bcl2/Bax蛋白表达和相互关系。结果内异康复栓与模型组相比，Bcl2蛋白的表达明显下降(P<0.01)，Bax蛋白的表达明显增加(P<0.01)。结论内异康复栓治疗子宫内膜异位症可能是通过Bcl2/Bax途径诱导异位子宫内膜细胞凋亡，应用于临床效果显著。【关键词】内异康

2、复栓;子宫内膜异位症;大鼠;细胞凋亡　　ABSTRACT：ObjectiveToinvestigatetheeffectofNeiyikangfuSuppositoryonexpressionofBcl2/Baxinectopicendometriumofrats.MethodsThemodelofendometriosisetrialtissueineverygroupetriummunohistochemicalstainingonoclonalantibodies.Resultsparedodelgroup,t

3、heexpressionofBcl2proteinetriosisbyregulatingtheexpressionofapoptosisrevelantgeneBax/Bcl2.　　KEYT)的发生和发展[1,2]。目前认为bcl2/Bax为相关调节基因，bax主要诱导凋亡，bcl2则抑制凋亡，本实验建立大鼠子宫内膜异位症动物模型，从基因水平探讨内异康复栓治疗子宫内膜异位症的作用机理。　　1材料和方法　　1.1实验动物　　健康雌性SD大鼠40只，体质量200±50g，武汉大学医学院实验动物中心提供，医动字第

4、19—084号。　　1.2主要药品和试剂　　内异康复栓浸膏:由大血藤(Coulissargentodoxae)、丹参、三棱、土鳖虫等组成,成都中医药大学附属医院制剂室提供(批号:050928);丹那唑胶囊0.1g/粒(上海华联制药有限公司012042)，Bax和Bcl2蛋白免疫组化检测试剂盒(武汉博士德生物工程有限公司产品)。　　1.3主要仪器　　轮转式石蜡切片机(浙江金华益迪医疗设备厂)，光学显微镜照相系统(日本Olympus公司)，H600型透射电子显微镜产品(日本Olympus公司)。　　1.4分组及给药　　

5、采用自体移植法[3]建立EMT大鼠模型,30h后随机抽动物剖腹证实模型成功后,随机分为内异康复栓剂量组(3.0g·kg-1·d-1),丹那唑组(0.2g·kg-1·d-1),模型组和假手术组，每组10只。内异康复栓浸膏剂量组直肠给药,丹那唑组灌胃给药,模型组和假手术组灌肠与内异康复栓组等容积的生理盐水。直肠给药前轻轻按摩并挤压大鼠肛门周围,促使直肠内积存的粪便排出,然后将直肠给药针头轻轻插入大鼠直肠约4.5cm,将药液缓缓推入,同时观察实验动物的状态,给药后观察30min,若有药液排出,即予补量。造模后30d开始给药,

6、持续给药30d。　　1.5标本的采集与处理　　于末次给药后，麻醉大鼠,立即剖腹肉眼观察异位子宫内膜形态，取异位病灶内膜组织和在位子宫送检。依据造模后病理组织形态学检查抽样结果,选取左侧子宫中段旁肠系膜异位内膜病灶及同侧子宫中段作为标本送检。　　1.6异位子宫内膜组织切片及电镜样品制备[4]　　分别取异位子宫内膜组织及假手术组正常子宫内膜组织。生理盐水冲洗后,光镜取材,常规制备组织切片及电镜样品。　　1.7检测指标与方法　　采用链酶亲和素2生物素2酶复合物(SABC)免疫组化检测,按试剂盒说明书操作,计算Bcl2和Ba

7、x蛋白阳性表达指数(positiveexpressionindex,PEI)，PEI=平均光密度×阳性细胞百分比×100。　　1.8统计学分析　　数据均以±s表示，用方差分析并作Groupt检验，以P<0.05为差异有显著性意义。　　2结果　　2.1透射电镜下观察大鼠异位子宫内膜上皮细胞的变化及凋亡细胞的形态　　模型组异位子宫内膜细胞的上皮细胞表面有较发达的微绒毛和丰富的丝状附着物，胞浆中有丰富的细胞器，线粒体、溶酶体、内质网、核糖体均正常，细胞间有典型的邻接结构，与正常内膜上皮细胞相似(图1)。丹那唑组和内异康

8、复栓组中分别可见异位子宫内膜细胞的上皮细胞表面微绒毛明显减少或缺失，胞浆中溶酶体增多，粗面内质网不同程度的扩张，线粒体肿胀呈空泡状，嵴消失，并可见凋亡小体(图2)。　　2.2内异康复栓对异位子宫内膜细胞凋亡的Bcl2蛋白表达的影响　　在模型组，Bcl2蛋白的表达(1.13±0.05)明显高于假手术组(0.67±0.08)，两者