小柴胡汤诱导内异症异位内膜细胞凋亡的研究

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1、小柴胡汤诱导内异症异位内膜细胞凋亡的研究作者：尹龙萍邓毅姚雷赵爱华贾伟【关键词】小柴胡汤；,,内异症；,,异位内膜细胞凋亡摘要：目的探讨小柴胡汤对内异症大鼠异位内膜细胞凋亡的影响。方法建立大鼠内异症模型，采用透射电镜技术及免疫组化方法，观察小柴胡汤对异位内膜细胞形态结构和Fas及Caspase-3蛋白表达的影响。结果中、高剂量小柴胡汤治疗后，异位内膜有较多腺上皮细胞出现凋亡的特征，表现为细胞体积变小，核固缩，胞浆和核染色质凝集，密度增高，细胞间凋亡小体，同时间质细胞中可见一些坏死细胞；异位内膜F

2、as蛋白、Caspase-3蛋白的表达水平明显高于其在位内膜。结论小柴胡汤可通过上调Fas蛋白的表达，诱导异位内膜细胞的凋亡。关键词：小柴胡汤；内异症；异位内膜细胞凋亡Abstract：ObjectiveToexploretheeffectofXiaoChaiHuDecoctiononectopicendometriumcellapoptosisinrats.MethodsUsingtheratmodel,ectopicendometriumwasevaluatedbyelectronmicro

3、scope.FasandCaspase-protEinexpressionintheendometriumandendometriotictissuewereobservedbyimmunohistochemicalTheglandularcellintheendometrialimplantaftertherapywithmiddleorhigh-doseof(10，1g・kg-1・d-1)XiaoChaiHuDecoctionshowedcharacteristicfeaturesofapo

4、ptosiswhichdisplayedbythecelldecreasedinsize,karyopyknosis,cytoplasmicandnuclearchromatincondensation,densityincreasedandalotofapoptoticbodiesamongcell.Whereassomestromalcelldisplayeddegenerationandnecrosis.TheprotEInexpressionofFasandCaspase-inendom

5、etriotictissueofXiaoChaiHuDecoctiongroupwashigherthanthatinthetherapeuticmechanismofXiaoChaiHuDecoctionforendometriosismayberelatedtopromotingtheapoptosisinendometriotictissuebyincreasingFasproteinexpression.Keywords：XiaoChaiHuDecoction;Endometriosis

6、；Apoptosis　　内异症病因复杂，目前无一种药物能达到根治效果。小柴胡汤是著名古方，由柴胡、黄芩、人参、半夏、炙甘草、生姜、大枣组成，具有免疫调节、抑制细胞增殖及诱导异常增殖细胞凋亡的作用［1］。我们曾在大体、光镜、电镜等形态学水平观察到，小柴胡汤可使内异症大鼠异位内膜明显萎缩，表明小柴胡汤对大鼠内异症具有治疗作用［2］。本研究观察小柴胡汤对内异症大鼠异位内膜细胞凋亡的影响，探讨小柴胡汤治疗内异症的作用机制。　　1材料动物60只雌性SD大鼠，体重220～250g，广东医学实验动物中心提供。

7、药品与试剂小柴胡汤，广州光华制药厂；丹那唑，江苏联环药业公司；Fas抗体，武汉博士德生物公司；Casepas-3抗体，NEWMARKER公司；链霉素抗生物素蛋白-过氧化酶免疫组化染色超敏试剂盒，北京中山生物技术公司。仪器JEOL-100CXII/T透射电子显微镜，日本电气公司；AO-820切片机，美国生物仪器公司；TIGER细胞图像分析仪，重庆大学泰格尔图像工程技术研究所。　　2方法.1内异症大鼠模型的复制参考Jones［3］方法建模。实验中60只大鼠共49只建模成功。.2分组与给药分为5组，即

8、小柴胡汤低、中、高剂量组、丹那唑组及对照组。小柴胡汤低、中、高剂量组分别给予5，10，1g/kg小柴胡汤；丹那唑组给予g/kg丹那唑；对照组给予蒸馏水。各组大鼠注入药物溶液体积均为20ml/kg，灌胃给药1次/d，连续4周。.3电镜观察给药4周后取材，标本经多聚甲醛-戊二醛固定液前固定h后，再经1%锇酸作后固定h，酒精、丙酮梯度脱水，Epon812渗透包埋，超薄切片机切片，铀铅双重染色，透射电镜观察。.4免疫组化法分析Fas及Caspase-3蛋白的表达按SP法染色。参照毛熙光等［4］方法，计算