活性污泥中超氧化物歧化酶(SOD)活性测定影响因素.pdf

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1、第3S卷第12期诧尉数求VO1.35No.122012年12月EnvironmentalScience&TechnologyDec.2012何乐韵,周后珍,谭周亮,等.活性污泥中趣氧化物歧化酶(s0D)活性测定影响因素[J】.环境科学与技术,2012,35(12):146—149.HeLe—yun,ZhouHou—zhen,TanZhou—liang,eta1.InterferentialfactorsindeterminationofSODactivityofactivatedsludge[J].EnvironmentalScience&T

2、echnology,2012,35(12):146—149.活性污泥中超氧化物歧化酶(SOD)活性测定影响因素何乐韵,-,周后珍.一,谭周亮,李旭东1,2(1.中国科学院环境与应用微生物重点实验室,四川成都610041;2.中国科学院成都生物研究所,四川成都610041)摘要:研究以污水生物处理中的活性污泥为对象,采用氮蓝四唑光还原法测定超氧化物歧化酶(SOD)活性,从样品制备和保存方面探讨了是否添加溶菌酶液、细胞破碎时间、酶液保存时间与保存温度等因素对SOD活性测定的影响。研究表明,溶菌酶液的加入提高了细胞破碎效果;细胞破碎的条件为99次(

3、工作3s,停3S),时间为40min时破碎效果最好;酶液保存时间在4h内最佳;-2O℃保存比4℃保存对酶活性影响小。最佳检测条件为:取样量为1mL时,反应温度为3O℃,反应时间为20min时,SOD酶活性最大。关键词:超氧化物歧化酶(SOD)活性污泥;超声破碎;氮蓝四唑光还原法(NBT)中图分类号:X830文献标志码:Adoi:10.39690.issn.1003—6504.2012.12.031文章编号:1003—6504(2012)12-0146—04InterferentialFactorsinDeterminationofSODAct

4、ivityofActivatedSludgeHELe—yun,ZHOUHou—zhen,TANZhou—liang,LIXu—dong。(1.KeyLaboratoryofEnvironmentalandAppliedMicrobiology;2.ChengduInstituteofBiologyofCAS,Chengdu610041,China)Abstract:Forthepurposeofdeterminingsuper-oxidedismutase(SOD)activityinactivatedsludgeofabiologicals

5、ewagetreatmentsystembythemethodofNBT(nitroblueterazoliumphoto—reduction),interferentialfactorswereinvestigatedinthispaper.Factorsstudiedfrompreparationtopreservationofthesampleincludedadditionoflysozymesolution,timeforcelldisruption,aswellastemperatureanddurationofenzymepre

6、servation.Theexperimentalstudyshowedthatwithsamplingof1milliliter.SODcouldreachthemaximumactivityundertheconditionof30℃ofreactiontemperatureand20minofreactiontime.Keywords:super-oxidedismutase(SOD)activatedsludge;sonication;NBT(nitroblueterazoliumphoto—reduction)超氧物歧化酶(简称SO

7、D)广泛存在于各种生物对污水处理系统中微生物本身氧化酶系统的影响研体内,它能催化超氧阴离子自由基(0一)发生歧化反究很少,本研究团队前期研究表明,SOD一定程度上应,所产生的过氧化氢在机体内易被过氧化氢酶分解能表征污泥受毒害的作用。然而,已有研究表明,测定成H2O和0从而解除O一对细胞的毒害作用。因SOD活性时,往往存在环境因素对其活性的影响。SOD作为自由基清除剂与机体的抗衰老、抗肿瘤、辐SOD属酸性蛋白酶,对pH值、热和蛋白酶水解射防护及植物抗逆性等有关,故正在日益引起人们的等比一般酶稳定,但是其活性和催化效率与其含量和重视【l1。所处环

8、境的理化因素有关[3]。本研究采用氮蓝四唑光污水处理中,活性污泥处理工艺得到了广泛运还原法测定活性污泥的SOD活性,重点探讨了溶菌用,随着工业的发展,废水中所含的有

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