光谱法研究顺铂与溶菌酶的相互作用.pdf

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1、光谱法研究顺铂与溶菌酶的相互作用陈晨，张洪峰，王乐，魏亚超，李倩(邯郸市中心医院药剂科，河北邯郸o560o1)中图分类号R969．1；R979．1文献标志码A文章编号1001—0408(2012)30—2847—03DOI10．60398．issn．1001—0408．2012．30．25摘要目的：研究顺铂与溶茵酶相互作用的光谱学特征。方法：应用光谱法研究顺铂与溶茵酶的相互作用机制；计算其结合常数、结合位点数和结合距离；根据热力学参数判断作用力类型；考察二者的相互作用对溶茵酶构象的影响。结果：顺铂对溶茵酶的荧光淬灭过程为生成复合物的静态淬灭；供能体与受能体之间的距离小于7nn

2、l，发生了非辐射能量转移；二者以氢键和范德华力结合为主；同步荧光光谱和三维荧光光谱表明结合反应影响了氨基酸残基所处的微环境。结论：顺铂能与溶茵酶结合并改变溶茵酶的构象。关键词顺铂；溶茵酶；荧光光谱法；紫外．可见光谱法；荧光淬灭SpectroscopicStudyontheInteractionofCisplatinwithLysozymeCHENChen，ZHANGHong．feng，WANGLe，WEIYa-chao，LIQian(Dept．ofPharmacy，HandanCentralHospi—tal，HebeiHandan056001，China)ABSTRACT0

3、BJECTIVE：Tostudythespectroscopiccharacteristicsoftheinteractionbetweencisplatinandlysozyme．METH．ODS：Theinteractionmechanismofcisplatinwithlysozymewasinvestigatedbyspectroscopicmethod；thebindingconstants，bind-ingsitesandbindingdistancewerecalculated；theinteractionforcewasestimatedbythermodyn

4、amicparameters；theefectsoftheirinteractinonconformationchangeoflysozymewereinvestigated．RESULTS：Thefluorescenceque,nchingmechanismofcispla．tinwithlysozymewasduetotheformationofcisplatin·lysozymecomplexwhichresultedinstaticquenchingprocedure．111edis—tancebetweendonorandaceeDtorwaslessthan7mn

5、，whichindicatedthattheenergynonradiativetransferoccurred．HydrogenbondsandVanderlsforcesplayedamajorroleinthebindingaction．Synchronousandthree．dimensionalfluorescencespectrarevealedthattheinteractionofcisplatinandlysozymeinfluencedtheenvironmentsofamideacidresidues．CONCLUS10N：Cisplat．incould

6、bindwithlysozymeandchangetheconformationoflysozyme．KEYWORDSCisplatin；Lysozyme；Fluorescencespectrometry；UVVisiblespectrum；Fluorescencequenching溶菌酶(Lysozyme，LYSO)是一种小分子碱性蛋白质，普1．2试药遍存在于鸟类、家禽的蛋清和哺乳动物的眼泪、唾液、血液、尿0．05mol·L三羟甲基氨基甲烷盐酸盐(Tris．HC1)缓冲溶液、乳汁和组织细胞中，能够和许多外源和内源性物质结合，液(内含0．1mol·L氯化钠，pH=：7．4)；

7、LYSO(国药集团化学运载多种药物。顺铂(Cisplatin)为细胞周期非特异性药物，具试剂有限公司，浓度：1×10一mol·L～，批号：F20080526)、顺铂有细胞毒性，可抑制癌细胞的脱氧核糖核酸(DNA)复制过程，(昆明贵研药业有限公司，含量：1X10～mol·L一，批号：并损伤其细胞膜结构，有较强的广谱抗癌作用，临床上用于治320080410，避光保存)均用上述缓冲溶液配制；其余试剂均为疗卵巢癌、前列腺癌、睾丸癌、肺癌等；其副作用常常是限制该分析纯，试验用水为双重蒸馏水。药剂量的重要因素，包括