运用蛋白指纹图谱技术筛选类风湿关节炎患者血清特异性标志物

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1、·18l8·理杂志ChineseJournalofPathophysiology2010，26(9)：1818—1823[文章编号]1000—4718(2010)09—1818—06运用蛋白指纹图谱技术筛选类风湿关节炎患者血清特异性标志物：}：张晓雪，袁兆林，朱敏，刘池波，沈波，徐巍，梁勇，王海宝(温州医学院附属台州医院，浙江台州317000；浙江省台州市立医院，浙江台州318000)[摘要]目的：用纳米磁珠与基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI—TOF—MS)技术检测类风湿关节炎(RA)患者血清蛋白质组，筛选候选蛋白标志物并建立诊断模型，初步探讨所建立的诊断模型在RA早期诊断中的

2、临床意义。方法：采用弱阳离子(WCX)纳米磁性微球捕获6O例RA患者、35例骨性关节炎(OA)患者和36名健康体检者血清中的蛋白质。所获蛋白经PBSⅡ一C蛋白质芯片阅读仪绘制蛋白指纹图谱。这些蛋白指纹图谱经CiphergenProteinChip和BiomarkerWizard软件分析之后，再用BiomarkerPatterns软件进行识别，最终筛选出RA的特异性蛋白标志物，并优化组合建立诊断模型。结果：在RA患者和对照组之间共找到33个差异蛋白峰(P<0．05)。其中质荷比(m／z)为15715．5D、7771．4D、8959．4D、8469．8D和8710．8D的蛋白峰用于建立RA诊断

3、模型。经双盲实验验证，该模型对RA诊断的敏感性为86．7％，特异性为90．0％。结论：采用WCX纳米磁性微球联用MALDI—TOF—MS技术可检出RA患者血清中的特异性蛋白标志物，并建立敏感性和特异性均较高的RA诊断模型。[关键词]关节炎，类风湿；基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱；弱阳离子纳米磁性微球[中图分类号]R593．22[文献标识码]Ad0i：10．3969／j．issn．1000—4718．2010．09．031Screeningforspecificbiomarkersinserumofpatientswithrheumatoidarthritisusingproteomicf

4、ingerprinttechniquesZHANGXiao—xue，YUANZhao一1in，ZHUMin，LIUChi—bo，SHENBo，XUWei．LIANGYong．WANGHai—bao(Ta&houHospitalofZhejiangProvince，AfiliatedHospitalofWenzhouMedicalCollege，Ta&hou317000，China；TaizhouMunicipalHospitalofZhefiangProvince，Ta&hou318000，China．E—mail：shenbkz@yahoo．corn．cn)[ABSTRACT]AIM：T

5、odetecttheserumproteinbiomarkersandestablishadiagnosticmodelforrheumatoidarothritis(RA)adoptingmatrix—assistedlaserdesorption／ionizationtime—of—flightmassspectrometry(MALDI一FOF—MS)combinedwithweakcationicexchange(WCX)magneticbeads，andtostudytheclinicalsignificanceofth,·mo,MinearlydiagnosisofRA．MET

6、HODS：Theserumsamplesfrom60patientswithRA，35patientswithosteoarthritis(OA)and36healthycontrolswerepreparedwithWCXmagneticbeads，andthenanalyzedonPBS11一Cmassspectrometerread—er．TheproteinspectraoftheserumsampleswerenormalizedbyCiphergenProteinChipsoftware．ThepeaklabelingwasperformedbyBiomarkerWizards

7、oftware．ThespecificproteinbiomarkerswerescreenedbyBiomarkerPatternsoftwaretoconstructadiagnosticmodelforRA．RESULTS：Totally33discriminativemass—to—charge(m／z)ratiowereidentifiedtoberelatedwithRA(P<0．05)．Amongthese