病理性近视眼患者血清蛋白质组学分子标志物筛选

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1、·246·中华眼科杂志2012年3月第48卷第3期ChinJOphthalmo1．March2012．Vo1．48．NU．3．论著．病理性近视眼患者血清蛋白质组学分子标志物筛选邵培辛瑜李荣秀陈凤娥张皙许迅孙晓东樊莹【摘要】目的探讨血清样本中差异蛋白质含量异常升高与病理性近视眼发病的关系。方法病例对照研究。选取病理性近视眼患者和同期正常人各30例。将病理性近视眼患者分为黄斑中心凹区视网膜脱离组8例，视网膜地图状萎缩组5例，黄斑裂孔组II例，脉络膜新生血管组6例。采用正常人血清免疫家兔制备多克隆抗体，ProteinA柱纯化混合抗体，溴化氰活化琼脂糖凝胶激活并合成亲

2、和介质，基于抗原、抗体吸附原理，取备用病理性近视眼患者及正常对照者各血清样本上PBS平衡过的抗体柱，去除大量背景蛋白；应用毛细管高效液相色谱和质谱法检测并分析剩余蛋白。差异蛋白质问的相关性采用非参数相关分析的K-S秩和检验。结果人选病理性近视眼患者血清样本去除大量背景蛋白后，分析并检测出4种表达明显增高的差异蛋白质：转甲状腺素蛋白(，ITI’R)表达阳性l8例(60．O％)，结合珠蛋白(HP)表达阳性11例(36．7％)，血清结合素(HPX)表达阳性10例(33．3％)，载脂蛋白(APO)表达阳性8例(26．7％)；这4种差异蛋白质间的表达阳性率呈正相关性(T

3、I'R与HP、HPX、APO相关性：r=0．480，0．577，0．492；HP与TYR、HPX、APO相关性：r=0．480，0．783，0．636；HPX与T豫、HP、APO相关性：r=0．577，0．783，0．853；APO与，rrR、HP、HPX相关性：r=0．492，0．636，0．853；P<0．05)。在黄斑裂孔组中，有7例rITl1R表达阳性；脉络膜新生血管组中，有6例患者HP、rI．I'R表达均阳性，5例患者HPX表达阳性。结论血清蛋白质组学分子标志物筛选法可以快速、有效去除正常人群和病理性近视眼患者共有的蛋白，从而发现可能与病理性近视眼相

4、关的蛋白。这些相关的功能蛋白有可能成为筛选病理性近视眼的分子标志物。f中华胺杂志，2012，48：246-252【关键词】近视，退行性；蛋白质组学；生物学标记；前白蛋白；触珠蛋白类；血液结合素；载脂蛋白B100ProteomiesanalysisofserumbiomarksinpatientswitllpathologicalmyopiaSHAOJun，XINYu，LIRong．xiu。CHENFer-eZHANGXi，XUXun，SUNXiao—dong，FANYing．DepartmentofOphthalmology，FirstPeoplesHospi

5、talAffiliatedtoShanghaiJiaotongUniversity，Shanghai200080，ChinaCorrespondingauthor：Ⅳring，Email：mdfanying@gmaiLcom【Abstract】ObjectiveToidentifyfhecorrelationbetweensel'om—baseddiferentiallyexpressedproteinsandpathologicalmyopia．MethodsItwasacase-controlstudy．n1eserumof30pathologicalmy

6、opiapatientsand30age．andgender．matchednormalcontrolswerecollectedfromShanghaiFirstPeopleSHospitalafiliatedtoShanghaiJiaotongUniversity．Thesepatientsweredividedinto4groupsincludingmacular-ofretinaldetachment(8cases)，retinalgeographicatrophy(5cases)，macularhole(1lcases)andchoreidalneo

7、vascular(6cases)．1’}leserumspecimensofnormalcontrolswereusedasimmunogentoimmunerabbitsinordertopreparepolyclonalantibodies．PurifiedbyProteinAcartridge．thesemixedantibodieswerethencombinedwithCNBr．activatedSepharoseSOastosynthesizeaffinitymediumwhichwas6nallyusedtotreattheserumspecim

8、ens．Accordingtothet