基于蛋白质组学技术筛选唐氏妊娠母体血清蛋白标志物的研究

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1、基于蛋白质组学技术筛选唐氏妊娠母体血清蛋白标志物的研究姚远1,张波1基金项目:重庆市科技攻关项目资助(No.CSTC2012gg-yyjs10046);第三军医大学成果转化基金项目资助(No.2013XZH04)。 作者简介:姚远,男,博士生,Email:yaofaraway@yeah.net,主要从事临床检验诊断学研究。*通讯作者:张波,男,主任医师,教授,Email:zhangbocq@aliyun.com,主要从事临床检验诊断学研究。,蒋滢2,罗娟1,吴玉娇1,姚宏3[400038重庆,第三军医大学西南医院检验科(全军检验医学中心)1;100091

2、北京,解放军第309医院检验科2;第三军医大学西南医院妇产科产前诊断中心3]【摘要】目的筛选唐氏(DS)妊娠母体血清蛋白标志物,初步验证其临床应用价值。方法收集确诊为DS妊娠的母体血清(DS组)和正常孕妇血清标本(对照组)各6例(均为16孕周采集),经二维凝胶电泳(2-DE)获得两组血清蛋白电泳图像,比较两组间蛋白含量变化,选取差异显著的蛋白质点进行生物质谱分析与鉴定,并采用westernblot(WB)方法验证筛选获得的血清蛋白标志物在DS妊娠母体血清中的变化情况(n=12)。结果通过2-DE图谱分析,共筛选出29个表达显著差异的血清蛋白质点。从中选取

3、6个表达差异较大的蛋白质点,经生物质谱技术分析和NCBI数据库搜索与匹配,发现CFHR1和Kininogen1等10个蛋白质与其匹配的可能性较大(匹配分值>66分)。WB结果显示,CFHR1和Kininogen1在DS组的积分光密度值(A值)分别为5687.0±727.8和133451.8±32118.8,均明显高于对照组的1414.1±715.6(P<0.01)和33073.9±14390.4水平(P<0.05)。结论2-DE和生物质谱分析是筛选蛋白质标志物的可靠方法,WB结果证实CFHR1和Kininogen1的异常变化可能与DS妊娠密切相关,有望成

4、为DS早期产前筛查的母体血清蛋白新标志物。关键词:唐氏综合征;CFHR1;Kininogen1;母体血清;产前筛查ExplorationofthelevelchangesandclinicalapplicationvaluesofCFHR1andkininogen1inmaternalserumfromDS-affectedpregnanciesYaoYuan1,ZhangBo1*,JiangYing2,LuoJuan1,WuYu-jiao1,YaoHong3(1Departmentof13/13LaboratoryMedicine,SouthwestH

5、ospital,ThirdMilitaryMedicalUniversity,Chongqing,400038,China;2DepartmentofLaboratoryMedicine,309thHospital,Beijing,100091,China;3DepartmentofObstetricsandGynecology,SouthwestHospital,ThirdMilitaryMedicalUniversity)*Corresponding author:ZhangBo,E-mail:zhangbocq@aliyun.com.【Abstra

6、ct】ObjectiveToexplorethelevelchangesofcomplementfactorH-relatedprotein1(CFHR1)andkininogen1inmaternalserumfromDS-affectedpregnanciesandtoevaluatetheclinicalapplicationvaluesofthesetwoproteinsinprenatalscreeningforDown’ssyndrome(DS).MethodsMaternalserumsamplesfrom6pregnantwomencar

7、ryingDSfetuses(DSgroup)and6normalpregnantwomenwithnon-DSpregnancies(controlgroup)inthesecond-trimesterwereanalyzedby2-dimensionalgelelectrophoresis(2-DE)toscreenforpotentialpredictivebiomarkersofDS-affectedpregnancies.ThentheserumproteinsexpressedmostdifferentiallyinDSgroupwereid

8、entifiedbymatrixassistedlaserdesorption/

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