响应面法优化固定化酶改善酸法大豆浓缩蛋白凝胶性的研究

《响应面法优化固定化酶改善酸法大豆浓缩蛋白凝胶性的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、第7期总第193期农业科技与装备No．7TotalNO．1932010年7月AgriculturalScience&TechnologyandEquipmentju1．2010响应面法优化固定化酶改善酸法大豆浓缩蛋白凝胶性的研究张莹．张春红(沈阳农业大学食品学院，沈阳110161)摘要：利用固定化谷氨酰胺转胺酶(MTG)对酸法大豆浓缩蛋白(sPc)进行改性，采用响应面法优化改性的工艺条件。结果表明，当固定化MTG添加量3．84U／g、反应温度49．57oC，pH值6．03、反应时间2．04h时，响应面优化后的SPC凝

2、胶性为7．33kcp，比未改性时提高27．26％。关键词：酸法大豆浓缩蛋白；固定化MTG；凝胶性；响应面分析·中图分类号：TS214．2文献标识码：A文章编号：1674—1161(2010)07—0020—04酸法大豆浓缩蛋白(SPC)是一种功能性大豆浓滤一载体一加酶反应一4℃过夜保存一抽滤清洗一缩蛋白，是蛋白质含量不少于60％的大豆蛋白产品，固定化酶[引。与大豆分离蛋白相比具有价格优势。提高大豆浓缩蛋2)MTG酶活力的测定：比色法[。白的功能性质尤其是其凝胶性。应用于肉制品加工中3)SPC凝胶性的测定：RVA一3D

3、型快速粘度分不但可以降低产品的成本，更可以提高产品的营养价析仪。值。谷氨酰胺转胺酶(MTG)是一种蛋白质聚合酶，能2结果与分析够催化蛋白质分子之间发生交联反应，大幅度增加蛋2。1固定化MTG操作稳定性白质分子量Il-。本试验主要采用响应面法优化了固用pH为6．0的缓冲液浸泡固定化MTG，在50定化MTG改性SPC的工艺条件。为扩大大豆浓缩蛋℃放置2h(模拟与底物反应)，重复测定固定化酶的白的应用范围提供一定的理论基础和实践经验。酶活。从图1可以看出，固定化酶连续反应10次，酶1材料与方法活仍维持在75％以上。1．1主

4、要材料12O大豆浓缩蛋白：山东新嘉华集团；谷氨酰胺转胺10O酶：江苏一鸣精细化工有限公司；壳聚糖：上海伯奥生80物技术科技有限公司；其他试剂均为分析纯。60谧401．2主要仪器盔20RVA一3D型快速粘度分析仪：澳大利亚Newport*0公司；PHS一3C精密pH计：上海雷磁仪器厂；UV2265紫外可见分光光度计：日本岛津；磁力恒温搅拌器：上海南江电讯器材厂；SHY22A水浴恒温振摇器：江苏图1固定化MTG的操作稳定性Hgure1OperationstabilityofimmobilizationMTG丹阳门科教仪器

5、厂。1．3试验方法2．2响应面分析法对固定化MTG改性SPC工艺1)固定化MTG的制备：壳聚糖一壳聚糖溶液+的优化凝结剂一壳聚糖微球一戊二醛交联反应一清洗抽在单因素试验的基础上，采用响应面设计试验，运用根据Box—Benhnken的中心组合试验设计原理，收稿日期：2010一O4一l1选择对SPC凝胶性有显著影响的4个因素加酶量作者简介：张莹(1986一)，女，硕士，从事植物蛋白质和酶工(A)、反应温度(B)、pH值(C)和反应时间(D)进行4程方面的研究。2010年第7期张莹等：响应面法优化固定化酶改善酸法大豆浓缩蛋

6、白凝胶性的研究21因素3水平的响应面分析试验，本研究以SPC凝胶2．3SPC凝胶性的晌应面试验及方差分析性为响应面变量，结果见表l。通过designexpe~软件进行二次响应面回归分表1SPC凝胶性的响应面试验设计与结果析(结果见表2)，得到如下多元二次响应面回归模影响不是单一的一次线性关系。交互作用显著，因此型：说明各因素之间的交互作用很好，整个响应面基于各Y(kcp)=7．26--0．25A--0．046B+0．087C+0．041D40．020AB+因素间的交互作用构成。0．088AC+0．0025AD+O．1

7、OBC40．O75BD+O．O85CD-O．21A2B2．4响应曲面分析0．26B2-0．24一0．28D做出响应曲面，分析加酶量(A)、反应温度(B)、从表2方差分析可以得出，SPC凝胶性方程的一pH值(C)和反应时间(D)对固定化MTG改性SPC凝次项和二次项极其显著，说明各具体因素对响应值的胶性的影响情况，结果见图2、图3、图4、图5。22农业科技与装备2010年7月注：表示显著(P<0．05)；{表示极显著(P

8、面图3A和B对改性SPC凝胶性影响的响应面Figure2R~ponsesurfaceoftheefectofA&DontheFigure3ResponsesurfaceoftheefectofA&BontheSPCgelcapacityimprovedSPCgelcapaeity通过designexpe~软件分析，由响应曲面和等高心组合试验设计