肿瘤坏死因子-α和白介素-2对成骨细胞增殖的影响

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1、微生物学杂志2010年5月第30卷第3期JOURNALOFMICROBIOLOGYMay2010Vo1．30No．3肿瘤坏死因子一和白介素-2对成骨细胞增殖的影响薛明，杨谛，李任(中国医科大学口腔医学院牙体牙髓科，辽宁沈阳110002)摘要成骨细胞在骨组织改建中至关重要。本试验体外培养人骨肉瘤细胞系MG63，MTT方法检测白介素·2(Interleukin一2，IL一2)和肿瘤坏死因子一Ot(tumornecrosisfactor—ol，TNF—Ot)对成骨细胞增殖的影响。结果表明，当IL-2的浓度大于100U／mL，其能够促进

2、成骨细胞增殖(P<0．05)，一定浓度(5O—l000U／mL)的TNF-0c对成骨细胞的增殖也有促进作用。关键词IL一2；TNF—d；成骨细胞；增殖中图分类号R392文献标识码B文章编号1005—7021(2010)03—0100一O3EflfectofInterleukin-2andTumorNecrosisFactor-onOsteoblastsProliferationXUEMing，YANGDi，LIRen(Dep．ofEndodontics，Col1．ofStomatology。ChinaMed．Unw．，Sheny

3、ang110002)AbstractOsteoblastsplayanimportantroleinthebonetissuerebuilding．HumanosteosarcomacelllineMG63wasculturedinvitro讥thestudy．TheeffectsofIL一2(interleukin一2)andTNF—ot(tumornecrosisfactor·仪)onproliferationofosteoblastsweretestedbyMTTassay．Theresultsindicatedthatw

4、hentheconcentrationofIL-2wasabove100U／mLandcertainconcentrationofTNF—Ctat50～1000U／mLcouldpromotetheproliferationofosteoblasts(P<0．05)．KeywordsIL-2；TNF·；osteoblasts；proliferation骨组织吸收是根尖周病变和牙周病变中一个胞中心)；DMEM培养基(Gibco，美国)；胎牛血清重要的病理改变，其治疗的最终目的是诱导成骨(天津灏洋生物制品)；胰蛋白酶(Amresco

5、，美细胞增殖，分泌基质从而矿化为骨组织，使缺失的国)；白介素-2(长春长生基因，20万国际单位／牙槽骨重建。成骨细胞的增殖受多种因素相互作支，批号20070806)；肿瘤坏死因子一Ot(上海赛达用的影响，包括激素、细胞因子和局部生长因子生物药业，500万国际单位／瓶，批号20090612)。等，这些因素的存在能够影响骨组织的形成和矿1．2方法化¨。本实验研究白介素一2(Interleukin一2，IL一2)1．2．1MG63细胞的培养从液氮中取出冻存的和肿瘤坏死因子-(tumornecrosisfactor—d，TNF．MG．6

6、3细胞，迅速放人37℃温水中，轻轻摇动冻)对成骨细胞增殖的影响，探讨影响成骨细胞增存管令其内容物尽快融化。用吸管吸出细胞悬液殖的病理机制。至离心管，加入新鲜培养基10mL，轻吹悬浮细胞，1000r／min离心5min，去上清，再用培养液重1材料与方法复洗1次。将MG．63细胞以5×10个／mL密度1．1材料接种于含10％胎牛血清、100U／mL青霉素、100MG63人骨肉瘤细胞系(中国细胞库典藏细Ixg／mL链霉素的DMEM培养基中，置于含5％作者简介：薛明男，副教授，博士。研究方向为根尖周炎微生物感染机制及治疗。Tel：024

7、-22895932，E-mail：alex—xm@sina．com收稿日期：2010．04~7；修回日期：2010~5-213期薛明等：肿瘤坏死因子一和白介素-2对成骨细胞增殖的影响lOlCO、37℃、饱和湿度的二氧化碳培养箱中培养，24h后换液1次。当细胞生长状态良好，至覆盖0·5培养瓶底80％时，以0．25％胰蛋白酶消化，进行O．4传代。1．2．2细胞增殖的测定取生长状态良好、几乎长满瓶底的MG63细胞进行传代，制备成浓度为1X10个／mL的细胞悬液，接种于96孑L培养板，分为1个对照组和l2个实验组，每组设4个复0·l孔，

8、每孔100IxL。37cI=、5mL／LCO培养箱培养0O51050100500100024h。实验组分别加入100tzL终浓度为5、10、50、100、500、1000U／mL的IL一2和TNF—d，对照浓度／(u·mL。)组加入等体积的DMEM培养基，继续培