csf和其诱导的破骨细胞对成骨细胞的影响的论文

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1、CSF和其诱导的破骨细胞对成骨细胞的影响的论文【摘要】目的：探讨gmcsf和其诱导的破骨细胞对成骨细胞生长的影响。方法：采用分组对照、细胞计数等方法进行研究。结果：gmcsf和其诱导的破骨细胞可以促进成骨细胞生长。结论：gmcsf和其诱导的破骨细胞促进成骨细胞增殖、分化，可能是通过破骨细胞内gmcsf介导的信号通路而发挥作用。【关键词】gmcsf破骨细胞成骨细胞　　effectofgmcsfanditsinducingosteoclastontheproliferationofosteoblast　　liuzheng,suny

2、uanming,xiaoxiangjun,liyumin,sunyong,yangfujun.　　instituteofradiationmedicine,chineseacademyofmedicalsciencespekingunionmedicalcollege,tianjin300192,china　　［abstract］objective:tostudytheeffectofgmcsfanditsinducingosteoclastonproliferationofosteoblast.methods:contrast

3、todivideintogroupstobeadoptedandthecellcounts,usetheanalysisofvariancetoexamine,definethisrelation.results:gmcsfanditsinducingosteoclastinducedproliferationofosteoblast.conclusion:gmcsfcanactivatethesignalpathetime,expressgeneresulttoproliferationofosteoblast.　　［keycsf

4、；osteoclast；osteoblast　　gmcsf对破骨细胞的发育有着重要作用，我们实验室建立了一整套的应用gmcsf等细胞因子将源于小鼠脾干细胞诱导培养成破骨细胞的技术［1，2］。.破骨细胞和成骨细胞彼此间相互作用，调节机体内的成骨和破骨作用的平衡。gmcsf介导的细胞信号传导通路引起破骨细胞内基因的表达是否对成骨细胞产生影响，目前还不清楚。我们采用分组对照、细胞计数等实验方法对此进行了观察。　　1材料与方法　　1.1材料、试剂4～6周龄c57雌性小鼠由中国医学科学院实验动物研究所提供；鼠成骨细胞株mc3t3e1购自am

5、ericantypeculturecollection公司；amem培养基为gibco公司产品；5氟尿嘧啶（5fu）购自上海旭东海谱药业有限公司；1，25（oh）2d3由丹麦lisebinderup博士惠赠；胎牛血清（fcs）、牛血清白蛋白（bsa）、琼脂、il3、il6以及gmcsf均购自中国医学科学院血液病学研究所。　　1.2破骨细胞的培养6周龄的c57雌性小鼠，按每只150mg/kg的剂量注射5fu，5天后拉颈处死。取出脾脏，制备脾细胞，将其接种于含5×104u/lil3、10-8mol/lil6、300ml/l

6、fcs及10g/lbsa的3g/lamem半固体培养基中，于37℃、5%co2条件下培养15天。形成的细胞集落，接种于含2×105u/lgmcsf和50ml/lfcs的amem培养液中，培养条件同前。然后将培养液换成含1×10-8mol/l1，25（oh）2d3、100ml/lfcs的amem培养液，上述条件再培养15天，于显微镜下观察到破骨细胞的生长。用1g/l胰酶消化细胞，在培养液中充分摇匀，转种到22个培养皿中，于同样条件培养20天。挑选出2个培养皿，对皿中的破骨细胞抗酒石酸盐酸性磷酸酶染色（trap），可以更清晰地看到生

7、长的破骨细胞，见图1～3。　　1.3成骨细胞的培养将mc3t3e1细胞接种于含100ml/lfcs的amem培养基中，37℃、5%co2培养20天左右，观察到成骨细胞生长。然后用1g/l胰酶消化，在培养液中充分摇匀，转种到20个培养皿中，于相同条件培养20天。　　1.4实验分组、培养与细胞计数培养20天的成骨细胞都充分生长，且30个皿内成骨细胞长势基本相同。将30个培养皿随机分为a、b和c组，每组10个平皿。a为实验组，b和c为对照组。将余下20个皿中生长的破骨细胞，用1g/l胰酶消化并在培养液中混匀，平均加入到a、b组中，同时向a、

8、c组每个皿内加入500u的gmcsf，37℃、5%co2培养20天。最后将培养皿中的细胞用胰蛋白酶消化下来，显微镜下对实验组和对照组的成骨细胞计数，结果进行方差分析。　　图1经trap染色的