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1、拟apoE对小鼠蛛网膜下腔出血及脑血管痉挛的治疗作用【摘要】目的：探讨新合成的拟载脂蛋白E(apoE)对蛛网膜下腔出血(SAH)的治疗作用及机制.方法：55只C57BL6/JL小鼠随机分为：假手术组，SAH组，低剂量(SAH+apoE1410,0.6mg/Kg)组和高剂量(SAH+apoE1410,1.2mg/Kg)组.显微操作戳破右侧大脑屮动脉(MCA)和大脑前动脉(ACA)分叉处造成SAH模型.术后30min开始经尾静脉给药，每12h—次，连用3d.每LI检测小鼠的一般精神状态、神经功能评分、综合运动能力评分.术后第3测量MCA育径.结果：术后SAH组小鼠精神菱靡，食欲下降，有的难
2、进食水，体质量下降，死亡率为42.8%.高、低剂量组与SAH组比较，一般症状明显减轻，死亡率分别为14.2%和18.8%，与SAH组比较，显著降低(P0.05).综合运动能力评分在SAH组(58.8±25.7)明显低于假手术组(272.2±25.7,P【关键词】蛛网膜下腔出血；拟apoE；apoE基因；脑血管痉挛载脂蛋白E(apoliopoproteinE,apoE)在屮枢神经系统的生理、病理作用越来越受到重视.完整的apoE分子量大，正常状态下不能通过血脑屏障，限制了其作为外源性药物的治疗性应用［1］•内源性apoE或脑室内注射apoE全蛋白通过下调屮枢神经系统炎症反应、减轻氧化应激
3、、抗兴奋性氨基酸毒性、育接增加神经营养等作用发挥神经保护作用［2］拟apoE(133149)是体外重组来ElapoE受体结合区的一个17肽，外源性给药能透过血脑屏障，同时保留了apoE全蛋白的许多特性［3-4］.但有关体外重组apoE片断用于SAH的治疗性研究，目前国内外还少见报道•蛛网膜下腔出血(subarachnoidhemorrhage,SAH)患者脑脊液apoE水平下降，提示红poE与SAH的病理机制有关［5-6］.木研究采用静脉给药，旨在探讨拟apoE1410对实验性SAH及脑血管痉挛是否具有治疗作用.1材料和方法1.1材料拟apoE1410的合成：拟apoE1410,cet
4、vlASAibLRKLAibKRLLamide,12肽，分了量：1410D.由北卡罗来纳州立大学肽合成实验室合成.Leica手术显微镜(徳国Leica公司)；显微手术用器械，包括弯头手术银，手术剪刀，阻血夹及其持器等(瑞士).小动物呼吸机，麻醉机，血气分析仪(美国Harvarcl公司)；转棒仪(意大利UgoBasile公司)；图像采集及图像分析系统(加拿大图像研究公司，型号MCIDM5)；脑血管灌注装置，灌注胶(杜克大学多学科神经保护实验室).1.2方法1.2.1动物分组及SAH模型制备C57BL6/JL雄性小鼠55只,12〜14wk.随机分为4组:假手术组（4只）；SAII（SAII
5、+盐水）组（21只）;低剂量（SAH+apoE1410,0.6mg/kg）组（14只）和高剂量（SAII+apoE1410,1.2mg/kg）组（16只）.将小鼠气管插管,连接呼吸机,监测血压、血气和体温，控制在生理状态，显微手术戳破大脑屮动脉（middlecerebralartery,MCA）和大脑前动脉（anteriorcerebralartery,ACA）分叉处造成SAII模型.拟“poE1410溶丁•PBS,经尾静脉注射，SAII术后30min开始第一次，每12h—次，共用3d,其它两组只注射生理盐水.1.2.2神经功能检测评分参考文献［7］的方法进行.神经行为学主要检测动物的
6、面、颈部触觉，足掌痛觉，自由活动，双前肢对称性，攀爬能力，平衡运动能力等.检测总分为3〜21分.其中运动功能检测0〜12分，感觉功能检测3〜9分.1.2.3转棒实验应用转棒仪检测小鼠左右肢体的协调能力、平衡能力、体力与耐力等综合运动能力.该仪器rti一根育径为3cm的转棒和齿轮传送系统以及数显系统构成，在电力推动下进行加速度转动,最高转数为300转/分.在手术前一天上午（分组Z前），对所有小鼠进行训练.将小鼠放置在静止的转棒上，开动机器，开始加速度转动，小鼠可能会掉落，重新放冋转棒，共重新放冋转棒3次.休€10minZJri,进行第2次训练，同样的训练共进行3次.获取基数值：在上午接受
7、3次训练Z后，下午取每1只鼠的基数值.在转棒静止状态，将小鼠轻轻放在转棒上，开动机器，开始加速度转动，记录小鼠掉落的时间，或者记录当小鼠四肢抱住转棒,不能走动达到2圈，即360度时的时间，单位为秒（s）,共测定3次，每次Z间至少间隔10min,取其均值为手术前的基数.训练的目的是让所有实验组的小鼠均接受同样的学习训练，每只鼠的基数虽有微小差别，但可以视为相同.术后第2
8、_
9、开始，每LI进行1次，共3d.具体做法与取得基数时一致.1.2.4脑血管
