瘢痕疙瘩成纤维细胞中有关传导分子mrna水平的实验研究

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1、·848·JShanxiMedUniv，Nov2013，Vol44No11瘢痕疙瘩成纤维细胞中有关传导分子mRNA水平的实验研究弓军胜，冯瑞铮，余睿芳(山西医科大学第一医院整形科，太原030001；通讯作者，E—mail：f~l121@sina．com)摘要：目的比较转化生长因子13／Smad蛋白(TGF一13／Smads)信号传导通路中有关传导分子mRNA在瘢痕疙瘩成纤维细胞中的表达。方法切取确诊为瘢痕疙瘩患者的部分瘢痕疙瘩组织，正常者的皮肤作为对照组；细胞总RNA提取；反转录一聚合酶链反应(RT—PCR)检

2、测TIEG、Smad2、Smad7mRNA的表达。结果瘢痕疙瘩中成纤维细胞TIEG、Smad2mRNA表达远高于正常皮肤，Smad7mRNA表达低于正常皮肤(P<0．05)。结论瘢痕疙瘩中的成纤维细胞表达TIEG增高，使表达Smad2增强，Smad7减弱，促使瘢痕生成。关键词：瘢痕疙瘩；成纤维细胞；传导分子；mRNA表达中图分类号：R363文献标志码：A文章编号：1007—6611(2013)11—0848—03DOI：10．3969／J．ISSN．1007—6611．2013．11．004Studyonthe

3、levelsofrelevanttransductionmoleculemRNAinfibroblastsofpathologicalkeloidGONGJunsheng，FENGRuizheng，YuRuifang(DepartmentofPlasticSurgery，FirstClinicalCollege，ShanxiMeicalUniversity，Taiyuan03O001，China；Correspondingauthor，E—mail：frzll21@sina．com)Abstract：Objec

4、tiveTocomparethemRNAexpressionofTGF—Binducibleearlygene(TIEG)，Smad2，Smad7inkeloidfibroblasts．MethodsThekeloidtissueswerecollected，andthenormalskinswerechosenascontrols．TotalcellularRNAwasextracted．RT-PCRtechniquewasusedtodetecttheexpressionofTIEG，Smad2，Smad7

5、mRNA．ResultsTIEG，Smad2mRNAexpressioninkeloidtis—sueswassignificantlyhigherthanthatofnormalcontrols(P<0．05)，butSmad7mRNAwassignificantlylower(P<0．05)．Conclu—sionI’heincreaseofTIEGexpressioninkeloidfibroblastsmayincreasetheexpressionofSmad2anddecreasetheexpres

6、sionofSmad7，whichmaycontributetoabnormalproliferationoffibroblastsinkeloid．Keywords：keloid；fibroblast；transductionmolecule；mRNAexpression瘢痕的形成与成纤维细胞内高表达转化生长因疗。将标本漂洗数次，分别去除上皮，分别切成5块子p(transforminggrowthfactor-beta，TGF-B)信号关系2mmx2mm大小的组织块，送入无菌培养瓶中，加密切。TGF一13／S

7、mads信号通路异常活化，能有效地入RPMI1640培养液，培养4h后将培养瓶翻转，另刺激瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖、合成和分泌大量I、Ⅲ加5ml培养液及少量胎牛血清继续培养。每3—4型胶原，最后导致瘢痕的形成。TGF—B诱导早期基因d换液一次。待培养的成纤维细胞长满瓶底后，PBS(TGF-Binducibleearlygene，TIEG)能够模拟TGF．13／漂洗一次，用0．25％胰蛋白酶消化，按1：3传代，继Smads信号通路的生物学效应，增强TGF一13／Smads的续培养J。取第5代之内的细胞用于本实验研究

8、。转录因子的调控作用，并且发现TIEG增强Smads信1．2方法号通路的作用是通过上调Smad2基因转录，抑制1．2．1细胞总RNA的提取分别取瘢痕疙瘩与正Smad7启动子附近特殊的反应元件实现的。常皮肤组织的细胞共100例，并将其按TripureRea—本课题将通过对正常皮肤和瘢痕疙瘩成纤维细gent总RNA分离试剂盒说明进行提取RNA。胞体外培养的实验研究，对其TGF．13／Sma