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《瘢痕疙瘩成纤维细胞中有关传导分子mrna水平的实验研究》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、·848·JShanxiMedUniv,Nov2013,Vol44No11瘢痕疙瘩成纤维细胞中有关传导分子mRNA水平的实验研究弓军胜,冯瑞铮,余睿芳(山西医科大学第一医院整形科,太原030001;通讯作者,E—mail:f~l121@sina.com)摘要:目的比较转化生长因子13/Smad蛋白(TGF一13/Smads)信号传导通路中有关传导分子mRNA在瘢痕疙瘩成纤维细胞中的表达。方法切取确诊为瘢痕疙瘩患者的部分瘢痕疙瘩组织,正常者的皮肤作为对照组;细胞总RNA提取;反转录一聚合酶链反应(RT—PCR)检
2、测TIEG、Smad2、Smad7mRNA的表达。结果瘢痕疙瘩中成纤维细胞TIEG、Smad2mRNA表达远高于正常皮肤,Smad7mRNA表达低于正常皮肤(P<0.05)。结论瘢痕疙瘩中的成纤维细胞表达TIEG增高,使表达Smad2增强,Smad7减弱,促使瘢痕生成。关键词:瘢痕疙瘩;成纤维细胞;传导分子;mRNA表达中图分类号:R363文献标志码:A文章编号:1007—6611(2013)11—0848—03DOI:10.3969/J.ISSN.1007—6611.2013.11.004Studyonthe
3、levelsofrelevanttransductionmoleculemRNAinfibroblastsofpathologicalkeloidGONGJunsheng,FENGRuizheng,YuRuifang(DepartmentofPlasticSurgery,FirstClinicalCollege,ShanxiMeicalUniversity,Taiyuan03O001,China;Correspondingauthor,E—mail:frzll21@sina.com)Abstract:Objec
4、tiveTocomparethemRNAexpressionofTGF—Binducibleearlygene(TIEG),Smad2,Smad7inkeloidfibroblasts.MethodsThekeloidtissueswerecollected,andthenormalskinswerechosenascontrols.TotalcellularRNAwasextracted.RT-PCRtechniquewasusedtodetecttheexpressionofTIEG,Smad2,Smad7
5、mRNA.ResultsTIEG,Smad2mRNAexpressioninkeloidtis—sueswassignificantlyhigherthanthatofnormalcontrols(P<0.05),butSmad7mRNAwassignificantlylower(P<0.05).Conclu—sionI’heincreaseofTIEGexpressioninkeloidfibroblastsmayincreasetheexpressionofSmad2anddecreasetheexpres
6、sionofSmad7,whichmaycontributetoabnormalproliferationoffibroblastsinkeloid.Keywords:keloid;fibroblast;transductionmolecule;mRNAexpression瘢痕的形成与成纤维细胞内高表达转化生长因疗。将标本漂洗数次,分别去除上皮,分别切成5块子p(transforminggrowthfactor-beta,TGF-B)信号关系2mmx2mm大小的组织块,送入无菌培养瓶中,加密切。TGF一13/S
7、mads信号通路异常活化,能有效地入RPMI1640培养液,培养4h后将培养瓶翻转,另刺激瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖、合成和分泌大量I、Ⅲ加5ml培养液及少量胎牛血清继续培养。每3—4型胶原,最后导致瘢痕的形成。TGF—B诱导早期基因d换液一次。待培养的成纤维细胞长满瓶底后,PBS(TGF-Binducibleearlygene,TIEG)能够模拟TGF.13/漂洗一次,用0.25%胰蛋白酶消化,按1:3传代,继Smads信号通路的生物学效应,增强TGF一13/Smads的续培养J。取第5代之内的细胞用于本实验研究
8、。转录因子的调控作用,并且发现TIEG增强Smads信1.2方法号通路的作用是通过上调Smad2基因转录,抑制1.2.1细胞总RNA的提取分别取瘢痕疙瘩与正Smad7启动子附近特殊的反应元件实现的。常皮肤组织的细胞共100例,并将其按TripureRea—本课题将通过对正常皮肤和瘢痕疙瘩成纤维细gent总RNA分离试剂盒说明进行提取RNA。胞体外培养的实验研究,对其TGF.13/Sma
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