frnk对瘢痕疙瘩成纤维细胞凋亡的影响

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1、分类号：R622学校代码：10392学科专业代码：105109学号：20130061硕士学位论文FRNK对瘢痕疙瘩成纤维细胞凋亡的影响EffectofFRNKonApoptosisinKeloidFibroblasts学位类型：临床医学硕士所在学院：第二临床医学院研究生：潘明孟学科、专业：外科学（整形外科）导师：朱世泽主任医师∕教授研究起止日期：2013年7月至2015年4月答辩委员会主席：张鹏飞教授答辩日期：2015年06月07日二0一五年五月目录附录……………………………………………………………………1中文摘要………………………………………………………………2英文摘要……………

2、…………………………………………………4引言……………………………………………………………………6材料和方法…………………………………...……………………….81.标本来源和诊断标准...............................................................82.器材和试剂...............................................................................83.实验步骤.............................................

3、....................................114.统计分析.................................................................................15结果…………………………..………………………………………16讨论……………………………………………..……………………25结论………………………………………………..…………………29参考文献……………………………………………..………………30综述……………………………………….………....……….………33致谢…………………

4、…………………………….………….………41中英文对照缩略词表英文缩写英文全称中文全称FRNKFacoladhesionkinase-ralated黏着斑激酶相关非激酶nonkinaseFAKFacoladhesionkinase黏着斑激酶ERKExtracellularsignal-regulatedkinase细胞外调节蛋白激酶ECMExtracelluarmatrix细胞外基质HSHypertroficscar增生性瘢痕COL1A1Collagen,typeI,alpha1Ⅰ型胶原α1链COL3A1Collagen,typeⅢ,alpha1Ⅲ型胶原α1链FBsFibrobla

5、sts成纤维细胞HSCsHepaticstellatecells肝星状细胞VSMCVascularsmoothmusclecell血管平滑肌细胞1FRNK对瘢痕疙瘩成纤维细胞凋亡的影响摘要目的应用脂质体介导黏着斑激酶相关非激酶（FRNK）表达质粒转染瘢痕疙瘩成纤维细胞，探讨FRNK抑制黏着斑激酶（FAK）磷酸化对瘢痕疙瘩成纤维细胞凋亡的影响，及其与FAK-ERK信号转导通路、Ⅰ型胶原α1链（COL1A1）和Ⅲ型胶原α1链（COL3A1）之间的关系。方法（1）用Westernblotting及RT-PCR检测正常皮肤和瘢痕疙瘩中FRNK蛋白及mRNA水平；（2）应用体外细胞培养技术，

6、培养瘢痕疙瘩成纤维细胞，在脂质体介导下用FRNK表达质粒瞬时转染瘢痕疙瘩成纤维细胞，用膜联蛋白/碘化丙啶双标记流式细胞术检测细胞的凋亡，用Westernblotting检测FAK、p-FAK、FRNK、细胞外信号调节激酶1（ERK1）、细胞外信号调节激酶2（ERK2）、p-ERK1、p-ERK2等相关指标的蛋白质表达。用RT-PCR方法检测FAK、ERK、COL1A1、COL3A1等相关指标的mRNA表达。结果（1）瘢痕疙瘩组织块中的FRNK蛋白表达低于正常皮肤（0.14±0.08vs0.33±0.06），差异有显著意义（P<0.05)。瘢痕疙瘩组织块中FRNKmRNA表达低于正常

7、皮肤(0.30±0.04vs1.04±0.06),差异有显著意义（P<0.05)。（2）FRNK表达质粒转染瘢痕疙瘩成纤维细胞于转染后48hFRNK蛋白含量达最高，72h表达下降。（3）与空质粒组相比，FRNK组FAK、ERK转录及翻译水平均下降，FAK及ERK磷酸化水平也均下降（P<0.05）。（4）FRNK组与空质粒组相比，COL1A1、COL3A1mRNA的表达水平均下降（0.23±0.10vs0.85±0.02，0.60±0.02vs1.06±0.10，P<0