正交试验法优选枇杷叶的提取工艺

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1、JIANGXIJOURNALOFTRADITIONALCHINESEMEDICINE正交试验法优选枇杷叶的提取工艺★程露(江西中医学院附属医院南昌330006)关键词：枇杷叶；总黄酮；正交试验；提取工艺中图分类号：R284．2文献标识码：A枇杷叶为蔷薇科植物枇杷Eriobotryajaponica枇杷叶除去尘土和叶背面的绒毛，按先横后纵(Thunb．)Lind1．的干燥叶，别名巴叶、芦桔叶，是的顺序切分成长约1cm，宽1～2mm的小片，待用。一味常用中药，其味苦、微辛，性微寒，归肺、胃经，能2．2枇杷叶煎煮液的制备清肺止咳、和胃、降逆、止渴，主治肺热咳嗽、阴虚劳取枇杷叶小片100g，按试验设

2、计要求加一定量咳、湿疹等症⋯。据报道枇杷叶中主要含有黄酮类的水(沸水下料)、煎煮一定的时间和一定的次数，成分，具有降血糖、抗癌、抗氧化、抗病毒等作用。合并滤液，过200目滤布，70～80℃减压浓缩至药为有效利用枇杷叶所含黄酮类物质，笔者以枇杷叶液为1000ml，测定总黄酮含量。作为原料，以提取液的总黄酮含量为考察指标，对枇2．3总黄酮的含量测定杷叶的水煎煮工艺参数进行了优化试验。2．3．1标准品溶液的配制和标准曲线的建立精1仪器与试药密称取芦丁对照品6．0mg，用70％乙醇溶解并定容万分之一电子天平；数显恒温水浴锅(上海精至25mL，精密吸取芦丁对照品溶液0，0．5，1．0，2．宏实验设备有

3、限公司)；紫外．可见分光光度计(7520，3．0，4．0mL，分别加入0．3mL5％NaNO溶液，摇型，上海光谱仪器有限公司)；粉碎机；试验用枇杷匀，6分钟后加入0．3mL10％A1(NO)，溶液，摇叶(江西黄庆仁栈药店购买)；芦丁对照品(中国药匀，静置6分钟，各加入4．0mL4％NaOH溶液，并用品生物制品检定所)；无水乙醇；亚硝酸钠；硝酸铝；70％乙醇将溶液体积补足到10mL，放置lO～15分氢氧化钠等试剂均为分析纯。钟，于510nm处测定吸光值。以吸光值(x)和芦丁2方法与结果含量(Y)绘制总黄酮含量标准曲线：Y=0．1625X一2．1枇杷叶的前处理0．018，R：0．9993(／7,

4、=3)。驴驴驴驴驴己知TGF—B是一种具有多种生物学效应的细明黄芩苷可能是通过下调TGF—B的表达来参与防胞因子。在肺纤维化形成过程中，肺内TGF—B蛋治BLM诱导的大鼠肺纤维化。白表达明显上调，参与急性肺泡炎和组织修复反应。参考文献[1]高春芳，陆伦根．纤维化疾病的基础与J临床[M]．上海：上海科学研究认为TGF．p。在急性肺损伤的早期阶段可调控技术出版社．2004．244．肺泡上皮的离子通道和主动转运过程，增加了肺泡[2]张建春，张华．黄芩苷的研究近况[J]．时珍国医国药，2005，16上皮的渗透性，是由于TGF．B可抑制肺上皮细胞(3)：247—249．还原型谷胱甘肽的合成，从而发挥促

5、氧化损伤作用。[3]ChenMH，ChenJC，TsaiCC，WangWC，eta1．TheroleofTGF-pl此外TGF—B又可以通过下调分泌型的白细胞蛋白andcytokinesinthemodulationofliverfibrosisbySho-·saiko-toinrat§bileductligatedmodel[J]．JournalofEthnop—harmacology，2005，酶抑制剂而上调中性白细胞弹性蛋白酶的活性，而97(1，10)：7—13．导致上皮组织的进行性损伤。TGF—B还是Fas介[4]苏宁，周乐全，匡忠生，等．黄芩苷下调TGF—p、PKC表达减少肾导的肺

6、泡上皮细胞调亡的促进剂，促进肺泡上皮细小管IV．c沉积的作用[J]．中药新药与临床药理，2008，19(4)：胞调亡和肺的损伤。可见TGF—p。在肺泡炎阶272—274．段发挥至关重要的作用。本实验在国内外首次发(收稿日期：2010-04-01责任编辑：曹征)现，TGF．B，mRNA和蛋白的表达水平显著下降，表·70·江西中医药2010年7月第7期总41卷第331期2．3．2枇杷叶水提液中总黄酮的含量测定准确表3方差分析结果吸取待测枇杷叶水提液1mL，用70％乙醇溶解并定容至25mL，过滤，精密吸取续滤液2．0mL，按标准曲线测定的方法，依次加入各试剂，测定510nm处的吸光值，根据标准曲线

7、计算样品中的总黄酮含量。2．4水煎煮工艺参数的优化试验注：Fo0l(22)99·00，Fo05(22)19·00。．，2．4．1正交试验设计根据有关文献资料和预试2．4．3验证试验根据枇杷叶水煎煮工艺参数正验可知，影响枇杷叶水煎煮液中总黄酮提取效率的交试验优化结果，分别取枇杷叶进行煎煮验证试验，主要因素有加水量、提取时间、提取次数等等，因此，共3次并分别检测其水煎液中总黄酮的含量，结果采用(3)正交设计，以药