靶向Ku70基因siRNA对人肺腺癌细胞顺铂耐药性的逆转作用.pdf

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1、第38卷第2期吉林大学学报(医学版)Vo1．38No．22402012年3月JournalofJilinUniversity(MedicineEdition)Mar．2O12[文章编号]1671—587X(2012)02—0240～05靶向Ku70基因siRNA对人肺腺癌细胞顺铂耐药性的逆转作用黎萍，张捷，李亚荣。，王珂，苏振中(1．吉林大学第二医院呼吸内科，吉林长春130041；2．吉林大学第二医院血液肿瘤科，吉林长春130041)[摘要]目的：研究Ku70与人肺腺癌耐药的相关性，观察调控Ku70表达能否逆转人肺腺癌耐药细胞系(A549／DDP)的耐药性。

2、方法：采用RT—PCR、WesternBlotting方法比较Ku70在人肺腺癌亲代细胞(A549)与耐药细胞系(A549／DDP)的表达水平。转染靶向Ku70基因siRNA(si—Ku70)的A549／DDP细胞作为实验组，转染非特异性sirNA(si—Scramble)的A549／DDP细胞作为阴性对照组，同时设空白组(A549／DDP细胞)。加药组在转染后48h给予顺铂。应用MTT法检测各组细胞在顺铂作用下的生存率，并计算半数抑制浓度(IC。)，采用流式细胞仪定量检测细胞凋亡率；采用分光光度法检测Caspase一3活化程度。结果：Ku70mRNA和蛋白

3、在A549／DDP细胞表达水平显著高于其亲代A549细胞(P<0．01)；靶向Ku70的siRNA(si—Ku70)明显下调A549／DDP细胞的Ku70mRNA和蛋白表达水平(P

4、胞凋亡，逆转其耐药性，Ku70可能成为逆转肺癌耐药的一个新的分子靶点。[关键词]肺腺癌；耐药性；顺铂；Ku70；细胞凋亡[中图分类号]R734．2[文献标志码]AReversaleffectofKu70一targetedsiRNAonchemoresistancetocisplatininhumanlungadenocarcinomacellsLIPing，ZHANGJie，IdYa—rong。，WANGKe，SUZhen-zhong(1．DepartmentofRespirtoryMedicine，SecondHospital，JilinUniversit

5、y，Changchun130041，China；2．DepartmentofHematologyandOncology，SecondHospital，JilinUniversity，Changchun130041，China)Abstract：ObjectiveToinvestigatetheroleofKu70inthechemoresistanceoflungcancerandthepotentialofKu70small—interferingRNA(siRNA)asatherapyforreversalofcisplatinresistanceinl

6、ungadenocarcinoma．MethodsTheKu70mRNAandproteinexpressionlevelsweredectectedbyRT—PCRandWesternblottingmethodsinhumanlungadenocarcinomacellsA549andtheircisplatin—resistantvariantA549／DDP．TheA549／DDPcellsweredividedinto3groups：blankcontrol，negativecontrolgroupinwhichthecellsweretranfe

7、ctedwithnonspecificsi—RNA(si—Scramble)andexperimentgroupinwhichthecellsweretransfectedwithKu70一specific[收稿日期]2O11—1O一2O[基金项目]教育部博士学科点专项科研基金资助课题(200801830069)[作者简介]黎萍(1981一)，女，湖北省黄冈市人，主治医师，在读医学博士，主要从事肺癌发病机制及诊治的研究。[通信作者]张捷(Tel：0431—88796866，E—mail：doctorzhangj@sina．corn)网络出版时间：2012—0

8、3—0613：44网络出版地址：http：／／www