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《产碱性纤维素酶菌株的筛选及酶学性质研究.doc》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、产碱性纤维素酶菌株的筛选及酶学性质研究摘要：从采集的造纸厂土样中，筛选出1株产碱性纤维素酶酶活力较高的菌株H—1,经鉴定，该菌株为革兰氏阳性芽抱杆菌属。发酵产酶条件和酶学性质研究表明H—1菌株的适宜发酵条件为：接种量为6%,PH9.0,温度为37°C,此条件下的酶活力可达8.69U/mL，是初始酶活力的3倍。该酶最适反应温度为40°C,最适反应pH9.0。在25〜55°C,pH7.0~ll.0仍能保持60%以上的酶活力，能较好地满足日常洗涤的环境要求。关键词：碱性纤维素酶；菌株筛选；发酵条件；酶学性质中图
2、分类号：Q939.96文献标识码：A文章编号：0439-811421-4364-04ScreeningofAlkaline—Ce11u1oseProducingStrainandStudyonItsEnzymaicCharacterizationLUJin—zhenl,RENJun1,YANGWen—chaol,XIONGHan—guo2Abstract：Fromsoilsamp1escol1ectedfrompapermil1s,onestraincalledH—1capab1eofdegradingc
3、el1u1osewasscreenedandidentifiedasGram—positiveBaci11us.Theoptimumenzyme—producingconditionswereasfo1lows,inoculumamount6%,pH9.0,temperature37°C・Theenzymeactivitywasupto8.69U/mL,whichwas3timeshigherthantheinitialenzymeactivity.Theoptimalconditionsfortheen
4、zymaticreactionwereabout40°CandpH9.0.Theenzymeactivitycou1dbemaintainedabove60%attemperature25〜55°CandpH7.0〜11.0,whichmeettheenvironmenta1requirementsofthedailywashing.Keywords：a1ka1ine—ce11uloseenzyme；strainscreening；fermentationconditions；characteristic
5、sofenzyme纤维素酶的研究一般都以有效利用纤维素资源为主，酶作用的pH多为酸性，当添加到洗涤剂中，由于所处环境为碱性而失去活力，不能发挥作用［1］。近年来碱性纤维素酶的发现使其在洗涤工业中得到成功应用。碱性纤维素酶是纤维素酶系的一个组分，即竣甲基纤维素酶，它不含有纤维素酶系的其他两个组分，能作用于底物CMC。CMC属大分子多糖衍生物，它被降解后生成多种相对分子质量不等的低聚糖。碱性纤维素酶在对天然纤维素作用的过程中不能发生酶组分间的协同效应，不会使棉纤维受到较多的分解破坏［2,31它主要对棉纤维中占
6、10%左右非结晶区的纤维素分子起作用，对结晶区纤维素水解活力很低，因此不会明显降低棉纤维的牢固度，并能去除侵入衣物内部的尘泥皮脂，显著提高洗涤效果，节约洗涤活性物用量，减少环境污染，是目前世界洗涤工业发展的趋势［4］。因此研究和开发碱性纤维素酶产品具有重要的现实意义和经济价值。本试验从碱性土壤中筛选出1株产碱性纤维素酶的野生菌株，并对其摇瓶发酵产酶条件和酶学性质进行了研究，以期为工业化生产提供一定的理论参考。1材料与方法1.1材料1.1.1土样来源取自湖北省武汉市阳逻、黄陂等地造纸厂的碱性土壤。1.1.2
7、培养基斜面保藏培养基配方为：竣甲基纤维素钠10g,酵母膏4g,牛肉膏5g,蛋白腺5g,NaC15g,KH2P041g,琼脂粉15g,0.2mo1/L氢氧化钠调至pH9.0o分离培养基A：蛋白腺10g,酵母膏10g,竣甲基纤维素钠10g,NaC15g,KH2P041g,琼脂粉15g,0.2mo1/L氢氧化钠调至pH9.0o分离培养基B：KH2PO42g,2SO41.4g,MgSO40.3g,CaC120.3g,FeSO40.005g,MnSO40.0016g,ZnC120.0017g,CoC120.002g
8、,CMC2g,琼脂粉15g,0.2mo1/L氢氧化钠调至pH9・0。种子培养基：可溶性淀粉15g,酵母膏10g,CMC5g,KN031g,MgS040.5g,K2HP040.5g,FeS040.01g,0.2mo1/L氢氧化钠调至pH9.0o发酵产酶培养基：可溶性淀粉1og,酵母膏10「CMC10g,KN031g,MgSO40.5g,K2HP040.5g,FeS040.01g,0.2mo1/L氢氧化钠调至pH9.0o1・2方法
