金黄色葡萄球菌mgra蛋白对喹诺酮类药物耐药性影响研究

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1、2O·中国现代医药杂志2010年5月第l2卷第5期MMJC，May2010，Vol12，No．5·金黄色葡萄球菌MgrA蛋白对喹诺酮类药物耐药性影响研究程态英郭强忠张肄鹏李文郎李伟谭卫民王春燕【摘要】目的了解金黄色葡萄球菌MgrA蛋白对喹诺酮耐药性的影响，为临床治疗金黄色葡萄球菌感染提供实验室依据。方法以本实验室已经构建的MgrA高表达质粒为研究材料，采用琼脂平板倍比稀释法检测金黄色葡萄球菌耐药株和敏感株、转MgrA组的MIC、凝固酶活性、荧光定量PCR、半定量PCR。结果转MgrA的金黄色葡萄球菌对喹诺酮类药物的耐药性增高，其No

2、rA的表达与MgrA的表达具有线性关系，即MgrA高表达组的NorA表达也增高。结论isrA蛋白mRNA表达水平与金黄色葡萄球菌氟喹诺酮耐药性相关，其介导耐药的原因可能与NorA基因mRNA表达水平增高有关。【关键词】金黄色葡萄球菌MgrA喹诺酮Study011StaphylococcusaureusMgrAproteinonquinoloneresistanceChengTaiying,GuoQiangzhong,ZhangSipeng,ela1．DepartmentofClinicalLaboratoryMedicine，Gua

3、nlanHospital,Shenzhen518110【Abstract】ObjectiveTounderstandStaphylococcusaureusMgrAproteinonquinoloneresistanceforclinicaltreatmentofStaphylococcusaureusinfectioninprovidinglaboratorybasis．MethodsThislaboratoryhasbeenconstructedMgrAhighex—pressionplasmidasresearchmateri

4、al，usingagarplatedilutiontodetectdrug—resistantstrainsofStaphylococcusaureusandsensitivestrains，andthetransferMgrAgroupMIC，coagulationactivity，fluorescencequantitativePCR，semi—quantitativePCR．ResultsTheMgrAofStaphylococcusaureusquinoloneresistanceincreased，theexpressio

5、nofNorAexpressionMgrAlinearre-tationship，thatMgrAhighexpressiongroupofNorAexpressionalsoincreased．ConclusionMgrAproteinmRNAexpressionlevelsofStaphylococcusaureusfluoroquinoloneresistancerelatedtoitsmediatedresistancemightberelatedtoincreasedlevelofNorAexpressionofthege

6、nemRNA．【Keywords】StaphylococcusaureusbacteriaMgrAQuinolone金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus。S．au—转一螺旋DNA结合基序与E．coli的多重耐药调节reus)是一种重要的医院和社区获得性病原菌，可引基因MarR家族的螺旋一翻转一螺旋转录调节子基序起严重的全身感染。近年来，医院感染的金黄色葡同源，研究表明它能和norA启动子结合而启动萄球菌，特别是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA1NorA排出泵的高表达，从而导致细菌对喹诺酮类抗对抗菌药物有很高的耐

7、药性『l_。20世纪80年代出现生素的耐药性增加俐，为了研究MgrA介导金黄色的氟喹诺酮类药物在治疗MRSA导致的感染上曾葡萄球菌耐药机制，我们在早期的实验中完成了原一度被寄以很大期望，目前其耐药率达56．3％。但是核表达质粒的构建，并进一步探讨其对氟喹诺酮类目前随着该类药物广泛应用，多种细菌对其产生不药物的耐药机制。同程度的耐药。为了减缓耐药株的蔓延，更好地治1材料与方法疗金葡菌引起的感染性疾病，研究金葡菌耐药机制十分必要。MgrA是S．aureus的一个多功能MarR样1．1药物氟喹诺酮类氧氟沙星、环丙沙星、洛美沙基因调节子．曾

8、被命名为NorR、rat1，mgrA全长星．均由湘北威尔曼制药有限公司惠赠。444bp，位于norA上游约7kb处，编码约17kDa的1．2受试菌深圳市观澜人民医院微生物室分离菌蛋白。MgrA氨基酸序列的56到76位的螺旋～翻株，经重