解脲脲原体对氟喹诺酮类药物耐药性研究

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1、解脲脲原体对氟喹诺酮类药物耐药性研究作者：王蓓，徐金水，于红，金辉，羊海涛，艾静，郭海健【关键词】解脲脲原体；氟喹诺酮；最小抑菌浓度；gyrA耐药基因　　摘要：目的探讨解脲脲原体对氟喹诺酮类药物的耐药状况与gyrA基因突变之间的关系。方法对鉴定确认的解脲脲原体临床分离株，采用微量肉汤稀释法检测其环丙沙星、氧氟沙星和左旋氧氟沙星的最小抑菌浓度（MIC），随机抽取28株菌株，PCR扩增gyrA基因并测序，采用Blast比对法分析临床菌株与标准菌株的序列差异。结果解脲脲原体的环丙沙星、氧氟沙星和左旋氧氟沙星MIC50分别为8，4和2mg/L

2、；MIC90分别为64，16和8mg/L；在28株解脲脲原体菌株中，经测序分析发现gyrA基因3种突变形式：(1)101位丙氨酸改变为缬氨酸；(2)112位天冬氨酸改变为谷氨酸；(3)267位碱基T缺失。具有基因突变的菌株其MIC明显高于没有突变的菌株。结论江苏省部分地区解脲脲原体对第1、2代氟喹诺酮类药物耐药严重，此类药物不再适用于治疗解脲脲原体感染；解脲脲原体对氟喹诺酮类药物的耐药主要是由于gyrA基因突变导致相应氨基酸改变所介导。　　关键词：解脲脲原体；氟喹诺酮；最小抑菌浓度；gyrA耐药基因　　Studyonfluroquin

3、olonesresistanceandGyrAresistancegenemutationofureaplasmaurealyticum　　Abstract：ObjectiveTostudythestatusoffluoroquinolonesresistanceandGyrAgenemutationofU.urealyticum.MethodsInvitrosusceptibilities(Minimuminhibitoryconcentration,MIC)tociprofloxacin,ofloxaxinandlevofloxa

4、cinof84U.urealyticumstrainsfromclinicalpatientsinedbyabrothmicrodilutionmethod.SpecificfragmentsofgyrAgenesofrandomlyselected28strainsplifiedbyPCRandsequenced.BlastprogramtheMIC50ofciprofloxacin,ofloxacinandlevofloxacing/Lrespectively;TheirMIC90g/Lrespectively.Threealte

5、rationsofGyrAin28U.urealyticumstrainsinesubstitutionatposition112;(3)AnabsenceofTbaseatposition267.U.urealyticumoreresistanttofluoroquinolones.ConclusionMostofU.urealyticumisolatedfromJiangsuprovinceareresistanttociprofloxacin,ofloxacin,andlevofloxacin,andthesethreeanti

6、bioticsshouldnotusedtotreatinfectionofU.urealyticum.ResistanceofU.urealyticumtofluroquinolonesismainlyduetoalterationsofGyrA.　　Keyaurealyticum；fluoroquinolones；minimuminhibitoryconcentration(MIC)；gyrAresistancegene　　解脲脲原体（Ureaplasmaurealyticu，Uu）是导致男女泌尿生殖系统感染的主要病原之一。与其他

7、各种导致感染性疾病的病原微生物一样，Uu对各种抗生素也产生了耐药性，且耐药现象日益严重。氟喹诺酮类药物是治疗支原体感染的三大类抗生素之一，随着环丙沙星等的广泛使用，已发现Uu逐渐对其产生了耐药性。为了解目前Uu对氟喹诺酮类药物的耐药状况及其gyrA基因的突变情况，我们对江苏省部分地区分离的Uu临床菌株进行了实验研究。结果报告如下。　　1材料与方法　　11菌株来源84株Uu分离自南京市某医院妇产科就诊者和南京市、南通市疾病预防控制中心性病皮肤病门诊就诊者。采用支原体ID试剂（法国生物梅里埃公司）分离培养，并经022μm滤膜过滤培养和特异

8、性PCR检测等进行鉴定确认。　　12Uu对氟喹诺酮类药物的敏感性试验采用微量肉汤稀释法测定环丙沙星、氧氟沙星和左旋氧氟沙星等3种抗生素（江苏省药品检验所）测定Uu临床分离菌株的最小抑菌浓度（Minimuminhibito