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时间:2017-12-07
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1、第32卷第11期水产科学VoI.32NO.112013年i1月FISHERIESSCIENCENOV.20133种阿片肽对仿刺参消化系统脂肪酶活力的影响宋少峰,刘学迁,潘金华,孙娟,张壮志,陈甜甜,李晓捷(山东东方海洋科技股份有限公司,山东烟台264003)摘要:分别给仿刺参体腔内注射强啡肽、内啡肽和内吗啡肽及2的NaC1液,注射后1、3、9h时取其消化器官,采用分光光度方法测定脂肪酶活力水平,以研究3种肽对剌参脂肪酶活力的影响。试验结果表明,内吗啡肽对刺参消化系统脂肪酶的活力具有抑制作用;内啡肽对刺参消化系统脂肪酶活力先抑制,而后随着时间的延长呈现出促进作用;强啡肽对刺参消化系统脂肪酶
2、的活力具有抑制作用,并随着时间延长一直起抑制作用,说明阿片肽对仿刺参消化系统脂肪酶活力主要起抑制作用。关键词:阿片肽;刺参;消化系统;脂肪酶;酶比活力中图分类号:$968.9文献标识码:A文章编号:1003-1111(2013)I1-0676—03仿刺参(Apostichopusjaponicus)具有重要营暂养于实验室玻璃水族箱中,连续充气遮光,水温养价值,人工养殖具有极高的经济效益。我国仿刺14℃。每日早晚各换水一次。试验用药品内吗啡参养殖迅猛发展,尤其在烟台、威海、大连、青岛等肽、强啡肽、8一内啡肽均购自于Sigma公司,用前先地,仿刺参现已成为举足轻重的水产养殖种类n]。配成质量
3、浓度为100p.g/mL的母液,4℃保存。其阿片肽是一种神经活性物质,分为内源性阿片他试剂均为国产分析纯肽和外源性阿片肽。已发现的内源性阿片肽包括51.2试剂的制备大家族:脑啡肽、内啡肽、强啡肽、孤啡肽和内吗啡橄榄油的处理:取层析纯氧化铝10g(吸附杂肽[2]。外源性阿片肽,包括酪啡肽、乳啡肽。研究质)装于2cm×15cm的层析柱中,缓缓加橄榄油表明,这些阿片肽直接作用于消化道中的阿片肽受1O~15cm于氧化铝上,自然流出,去掉游离脂肪体,影响胃肠道的运动或者作为胃肠道激素的外源酸,得到无色透明装液体。称取Tris3.0g,去氧胆性调节剂,在小肠刷状缘降解成更小的疏水性阿片酸钠1.5g,
4、加底物溶液400mL溶解,用1mol/L肽,穿过肠黏膜进入外周血液,透过血脑屏障与中HC1调节pH至9.1,加底物溶液至500mL。取枢阿片受体结合,发挥其阵痛、呼吸抑制、促进睡250mLTris缓冲剂于500mL烧杯中,磁力搅拌,眠、调节行为、刺激摄食的功能口]。慢慢加入橄榄油乙醇液3.75mL,使其浓度达170酶是催化生物化学反应的一类特殊的蛋白质。~mol/L,吸时尖端插入液面下,呈均匀乳浊液止。关于甲壳动物消化酶的研究,大多集中在个体发育4℃保存。空白试剂的制备:3.75mL无水乙醇加阶段,尤其是幼体发育阶段的变化趋势[4-S]以及不Tris缓冲剂至250mL。同温度、pH[6]
5、和微生态制剂[8]对幼体期消化酶的1.3仪器影响。有关阿片肽对水产经济无脊椎动物消化系试验用仪器:Elix/Rios纯水制造系统、分光光统消化酶的研究较少。度计、台式高速离心机、伯乐550型酶联免疫检测本试验拟探讨3种阿片肽对仿刺参消化系统仪(BIO-RAD公司产品)。脂肪酶的影响,旨在丰富阿片肽的作用和仿刺参消1.4脂肪酶的测定方法化机理,为仿刺参的科学人工养殖提供基础资料。1.4.1试验前处理试验设1个对照组、3个试验组,对照组注射1材料与方法5OL细菌过滤器抽滤的2的NaC1溶液、试验组1.1材料分别注射100btg/mL强啡肽、B一内啡肽和内吗啡肽试验仿刺参购自烟台市泰华海珍品养
6、殖公司,各5OL。注射后暂养于连续通气玻璃水族箱中。收稿日期:2013—03一I3;修回日期:2013—05—15.基金项目:烟台市科学技术发展计划项目(2010113).作者简介:宋少峰(1984一),男,助理工程师;研究方向:水产养殖工程.E—mail:attention7@163.corn.第11期宋少峰等:3种阿片肽对仿刺参消化系统脂肪酶活力的影响6771.4.2内脏匀浆液样品制备2结果用已消毒的解剖剪、解剖刀,取刺参内脏团于42.1内吗啡肽对仿刺参脂肪酶活力的影响℃预冷的玻璃匀浆器中,每次3只以消除个体差注射内吗啡肽1h后,仿刺参脂肪酶活力受到异。注射阿片肽后1、3、9h,分别
7、取4mL2%的抑制,且与对照组差异极显著(P<0.01)(图2)。3NaC1溶液为匀浆液匀浆,匀浆后10000r/min离h后内吗啡肽促进仿刺参脂肪酶活力,且均差异显心10min,移出上清液即得样品溶液。著(P<0.05)。9h后,内吗啡肽对仿刺参脂肪酶的1.4.3脂肪酶的测定活力具有微弱的抑制作用,且差异显著(P
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