鸢尾属药用植物总dna提取方法的比较研究

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1、第29卷第3期中国野生植物资源V01．29No．32010年6月ChineseWiPkrttResourcesJun．2010doi：10．3969／j．issn．1006—9690．2010．03．011鸢尾属药用植物总DNA提取方法的比较研究肖婷婷一，朱艳，叶波平，金国度，秦民坚(1．中国药科大学中药资源学研究室，江苏南京211198；2．教育部现代中药研究重点实验室，江苏南京，210009；3．中国药科大学生命科学与技术学院，江苏南京，210009)摘要以鸢尾属(L．)药用植物鸢尾IristectorumM

2、axim．叶片为材料，分别采用CTAB法、高盐低pH法、SDS法和试剂盒法四种方法提取植物总DNA，并通过琼脂糖凝胶电泳、紫外分光光度计、ISSR和RAPD四种方法对所提取的DNA样品进行检测。结果表明，用SDS—I法提取的植物总DNA纯度、浓度和完整性都很高，从经济角度考虑优于用试剂盒提取，从提取效果考虑不亚于用CTAB法和高盐低pH法提取，是比较适合鸢尾属植物总DNA提取的方法。关键词鸢尾属；鸢尾；DNA提取；方法中图分类号：Q523文献标识码：A文章编号：1006—9690(2010)03一OO46—05C

3、omparisonofMethodsofDNAExtractionfromIr／sL．XiaoTingting，ZhuYan一，YeBoping。，JinGuoqian一，QinMinjian·(1．DepartmentofResourcesScienceofTraditionalChineseMedicines，ChinaPharmaceuticalUniversi—ty，Nanjing211198，China；2．KeyLaboratoryofModernTraditionalChineseMedicines

4、ofMinistryofEducation，ChinaPharmaceuticalUniversity，Nanjing210009，China；3．CollegeofLifeScienceandTechnology，ChinaPharmaceuticalUniversity，Nanjing210009，China)AbstractUsingtheleavesofIr／sL．astestmateria1．theeffectsofDNAextractionwerecomparativelyanalyzedamongt

5、heCTABmethod，hi【ghsaltmethod，SDSmethodandDNAMinprepkitmethodbymeansofagarosegeleleetrophoresis，UV，ISSRandRAPD．TheexperimentresultsshowedthattheSDS—ImethodwasthebestDNAextractionforIr／sL．．KeywordsldsL．；眦tectorumMaxim．；DNAextraction；Method鸢尾属(Ir／sL．)是鸢尾科(Iridac

6、eae)中最大的类化合物，具有良好的清热解毒、利咽消痰、消积、泻一个属，全世界约有250余种，我国约产60个种、13下等作用。中国有较丰富的鸢尾属野生资源，而野个变种及5个变型，主要分布于西北、西南及东北等生资源往往蕴藏着更为丰富优良的基因，是品种改地⋯。鸢尾属植物因其大多具有既可观花又可观良及种质创新等重要的基因来源。但由于品质繁多叶的价值而被广泛用于切花、盆栽及园林绿化等。且在形态上比较相似，极易混淆和误用，从而影响了鸢尾属植物还具有重要的药用价值，如鸢尾和射于药材的质量和效果。因此建立一种科学、可靠、方便是

7、常用的中药，其内所含的主要化学成分均为黄酮的鉴定方法成了当务之急。随着分子生物学技术的发展，DNA分子标记技术不仅在农业上对植物选收稿日期：2009—1O一18种、育种和改良等方面的应用稳步增长，而且在中药基金项目：国家科技基础条件平台工作项目(2005DKA21004)资源、鉴定、栽培等方面也有着很好的发展前景。其作者简介：肖婷婷(1984一)，女，研究生，主要从事药用植物中，如何有效地提取高质量的植物DNA已成为药用种质资源及其质量评价的研究。}通讯作者。E—mail：minjianqin@163．com植物

8、种质资源研究的一个重要方面。植物DNA的--——46·-———第3期肖婷婷，等：鸢尾属药用植物总DNA提取方法的比较研究有效提取，它是进行任何分子生物学工作的前提和1．2．1高盐低pH法基础，也是最关键的一步J。鸢尾属药用植物总采用提取缓冲液A进行提取。然后10000r／DNA提取方法的比较研究在国内外未有相关报rain离心10rain，取上清液加入2／3体积2．5mol