植物叶片酚酸类物质微量提取分离与GC-MS分析-论文.pdf

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1、山东林业科技2012年第2期总199期SHANDONGFORESTRYSCIENCEANDTECHNOI()GY2012．No．2文章编号：1002—2724(2012)02—0008—04植物叶片酚酸类物质微量提取分离与GC—MS分析赵艳玲。，蒋湘宁。(1．华侨大学化工学院，福建厦门361021；2．北京林业大学生物科学与技术学院)摘要：建立了一种微量提取植物新鲜叶片中肉桂酸、香豆酸、阿魏酸和芥子酸的方法。首先由甲醇：水：甲酸提取缓冲液过夜抽提新鲜样品，以4一甲氧基苯甲酸作为内标，利用酚酸类物质在不同pH值溶液中的溶解性不

2、同，分别用乙酸乙酯和5NaHCO。溶液初步纯化提取物；由自制的微量C18柱纯化提取液，并确定45甲醇／O．1M醋酸的柱洗液回收效率最高。建立了气相一质谱联用仪同时分析4种酚酸的程序方法，确定了4种酚酸的硅烷化温度和时间，并通过提取杨树、银杏、杜仲、华山松4种树木新鲜叶片的酚酸物质验证此方法的可行性。关键词：肉桂酸；香豆酸；阿魏酸；芥子酸；GCMs中图分类号：Q946．819文献标识码：AMethodofleafphenolicacidsmicroisolationandGCMSanalysisZhaoyanling～，Jia

3、ngXiangning(1．collegeofchemicalengineering，HuaqiaoUniversity，Xiamen361021，china；2．CollegeofBiologicalSciencesandBiotechnology，BeijingForestryUniversity)Abstract：TransP—coumaric，trans—cinnamic，trans—ferulicandtranssinapicwereidentifiedbymeansofGC—MSmethodi—solatedby

4、meansofcarbon18columnfromleavesofPopulustomentosa，Ginkolbiloba，EucontmiaulmoidesOliv．andPinusarmandiiFranch．Thecompoundsweredistilledbymethylalcohol：H。()：formicacid(15：4：1)fromfinelygroundleavesandtheaqueousacidicsolutionwasextractedwithethylacetateand5NaHCO3altern

5、ately．Afterfiltration，theacidsdissolvedin45methylalcohol／0．1MaceticacidwashedcrosstheC18columnwerecollectedanddrynessinnitrogen．Keywords：trans～P—coumaric，transcinnamic，trans—ferulic，trans—sinapic，GCMS酚酸是植物中一种重要的中间代谢物，与木质(Galis，I．，eta1．，2004)。素合成、类黄酮以及植物的生长、抗逆有关。酚酸在

6、酚酸提取方法多样，由于所提取的酚酸的性质、植物体内有两种存在形式，自由酚酸和交联酚酸形结构不同而不同，现在对于一类酚酸或者几个酚酸式，后者是以酚酸酯的形式互相交联，在细胞壁中与的提取没有统一的方法。一般使用固相分离或者分木质素单体结合(T．Beveridge，eta1．，2000)。自由馏的方法，首先是采取可以溶解酚类化合物的提取的酚酸在植物抗uV～B中有避害作用，主要是通液溶解研磨好的材料，一般时间控制在24小时以过酚酸类化合物的积聚，使酚酸的表皮具有屏蔽内，否则酚酸类物质会有氧化，然后去除非酚酸类成UV—B的作用，从而保

7、护叶肉细胞(Schmitz—Ho—分：酯类、多糖、蛋白质、叶绿素等(Naczk，M．，Sha—erner，R．Weissenbo，G．，2003)。hidi，F．，2004)。但对于微量的鲜植物材料酚酸提酚酸在不同的植物，植物的不同部位，甚至植物取目前并没有很好的方法。本文建立了一个微量提不同的器官、组织、细胞中的分布都不同。有研究发取植物叶片肉桂酸、香豆酸、阿魏酸和芥子酸的方现，当果实受创伤时，除了与果实的成熟程度、受伤法，通过GC—MS分析方法同时分析了四种酚酸类的大小和氧气的供应量有关(Bunsiri，A．，eta1．

8、，物质。2003)，还会导致酚酸类物质含量降低，木质素形成，1材料促使果实变得更加坚硬以抵御外伤。另外有研究表明植物中酚酸的含量变化可以影响植物激素的行为1．1植物材料收稿日期：2O12O328*基金项目：福建省科技计划重点项目(2010N0018)作者简介：赵艳玲(1978一)，女，理学