纳豆激酶生产菌BSNK-5鉴定及发酵条件优化-论文.pdf

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1、生物技术通报·研究报告·BIOTECHNoLoGYBULLETIN2013年第2期纳豆激酶生产茵BSNK-5鉴定及发酵条件优化李淑英聂莹杜欢赵仲麟袁超李燕。宋晓燕4唐选明(1．中国农业科学院农产品加工研究所，北京100193；2．河南农业大学理学院，郑州450002；3．郑州轻工业学院食品与生物工程学院郑州450002；4．河南农业大学食品科学技术学院，郑州450002)摘要：对分离的纳豆激酶生产茵BSNK．5进行初步鉴定；并对其液体发酵产酶条件进行了初步研究，旨在提高纳豆激酶的产量。通过鉴定BSNK一5为枯草芽孢杆菌属菌株。试验优化了发酵培养基的最适氮源和碳源种类

2、及百分含量，发酵培养基的起始pH值，最适种子接种量，发酵温度，培养时间等。最终确定了两个最适的产酶条件，在该条件下，BSNK一5通过液体发酵产纳豆激酶的活力高达1160U／mL，比优化前提高283％。关键词：枯草芽孢杆菌纳豆激酶液体发酵Identification0fBSNK一5andOptimization0fthet1一IermentaUJ●0n，0nn1l●UJ●0nSLiShuyingNieYingDuHuanZhaoZhonglin。YuanChaoLiYanSongXiaoyan4TangXuanming(1．InstituteofAgro-produc

3、tsProcessingScienceandTechnology，ChineseAcademyofAgricuhuralSciences，Beijing100193；2．CollegeofSciences，HenanAgriculturalUniversity，Zhengzhou450002；3．SchoolofFoodandBiologicalEngineering，ZhengzhouUniversityofLightIndustry，Zhengzhou450~2；4．CollegeofFoodScienceandTechnology，HenanAgricultu

4、ralUniversity，Zhengzhou450002)Abstract：NattokinaseproductionbacteriaBSNK一5waspreliminarilyidentified．TheefectsofliquidfermentationonnattokinaseactivityproducedbyBSNK一5werestudiedinordertoimproveproductionyield．BSNK-5isaBacillussubtilis．Differentcarbonsources，nitrogensources，●pH，inocula

5、tesize；temperature，andtimewereoptimized．Twooptimumcultureconditionswereobtained．Thenattokinaseactivitywas1160U／mEundertheoptimumcultureconditions，whichwas283％timesoftheformercultureconditions．Keywords：BacillusnattoNattokinaseLiquidfermentation纳豆激酶(SubtitisinNAT)是由枯草芽孢杆菌与临床应用的溶栓药物相比，纳豆激

6、酶具有溶纤活分泌表达的高效纤维蛋白溶解酶，最早从传统的日性高、安全可靠、无毒副作用、半衰期长、在胃肠本大豆发酵产品纳豆中发现⋯。纳豆激酶对纤维蛋道中稳定性好等优点。该蛋白除了静脉注射外，还白显示了极高的底物特异性，其血栓溶解活性是可以口服，生产成本低廉’，具有重要的开发价值。纤溶酶的4倍’。纳豆激酶可以直接溶解交联状优化培养基组成和发酵工艺，可以明显提高芽的血栓块，还可以催化血纤维蛋白溶酶原转化为血孢杆菌的纳豆激酶产量。本试验对分离筛选的纤维蛋白溶酶，增加体内血栓溶解因子的合成，失纳豆激酶生产菌BSNK．5进行了菌落形态观察和分活纤维蛋白溶解抑制剂等一J。纳豆激酶除

7、了溶解子鉴定；并采用单因素和正交试验对筛选菌株产纳血栓外，还可以降血压、血脂和胆固醇，诱导晚豆激酶的液体发酵条件进行了初步研究，以期提高期玻璃体分解，治疗玻璃体视网膜紊乱病人等。纳豆激酶产量，为该酶的进一步扩大培养奠定基础。收稿日期：2012—09—29基金项目：中国农业科学院科技经费项目(201211)作者简介：李淑英，女，博士，助理研究员，研究方向：微生物生化与分子生物学；E-mail：lishuying@caas．net．cn通讯作者：唐选明，男，副研究员，研究方向：食品科学；E—mail：tangxuanming@caas．net．cn2013年第2期李