硒纳豆激酶液体发酵研究-论文.pdf

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1、食品，业斜枝生王连，．34，No．08，2013硒纳豆激酶液体发酵研究徐慧，吴晖，尹志娜，赖富饶(华南理工大学轻工与食品学院，广东广州510640)摘要：通过向液体培养基中添加无机硒，利用纳豆茵的发酵作用实现无机硒到有机硒的生物转化，并与纳豆激酶结合，得到硒纳豆激酶。最优发酵条件为：大豆蛋白胨2．5％，葡萄糖2％，Na2SeO3lO~mol／L，MgSO40．05％，CaC120．02％，KzHPOdKH2P00．2％／0．1％，培养基pH7，培养温度37℃，接种量2％，培养时N60h。所得硒纳豆激酶酶"~196．81U／mL(Folin一酚法)，其SDS—PAGE凝胶电泳条带的硒

2、含量为0．060txg／g，远高于不含硒发酵液对照样。关键词：纳豆激酶，硒，液体发酵StudyontheliquidfermentationofSelem’NattokinaseXUHui，WUHui，YINZhi—na，LAIFu-rao(CollegeofLightIndustryandFoodScience，SouthChinaUniversityofTechnology，Guangzhou510640，China)Abstract：ThisstudyrealizedthebiologicaltransformationfOrminorganicseleniumintoorg

3、anicseleniumbyliquidfermentation0ftheBacilusnatto．andobtainedSelem’Nattokinase．Optimalfermentationconditionswere2l5％soypeptone，2％glucose，10mol／LNa2SeO3，0．05％MgSO4，0．02％CaCI2，0l2％／0．1％K2HPOJKH2PO4，pH7．0．fermentationtemperature37oC，inoculumsize2％，fermentationtime60h．Undertheseconditions，theactiv

4、ityOftheSelem’Nattokinasereached196．81U／mL(Folin—phenolmethod)，andtheseleniumcontent0fitsSDS-PAGEproteinbandwas0．060pg／g．Keywords：NaRokinase；Selenium：liquidfermentation中图分类号：TS201．3文献标识码：A文章编号：1002—0306(2013)08—0219～05纳豆激酶(Nattokinase，NK)是一种由纳豆菌或1材料与方法纳豆枯草杆菌产生的碱性丝氨酸蛋白酶。日本的1．1材料与设备Sumi于1987~g首次

5、从日本传统食品纳豆中发现并命纳豆菌四株本实验室保存；Na：SeO，天津市名_l_21。纳豆激酶具有很强的纤溶活性，能直接作用于福晨化学试剂厂；酪氨酸(色谱纯)上海源聚生物纤溶蛋白，也能激活体内的纤溶酶原。与其他溶栓类科技有限公司；Se标准品(国家标准样品编号GSBG药物相比，NK具有安全性好、成本低、纤溶活性强、62029—90)国家钢铁材料测试中心钢铁研究总院；可口服、作用时间长等优点，正作为一个开发预防和HC1(优级纯)广、I'l~L学试剂厂；HNO(优级纯)广治疗血栓药物的研究热点【3。硒(Se)是人与动物正州化学试剂厂；硼氢化钠天津市福晨化学试剂厂；常生理活动所必需的一种微

6、量元素，在地壳中的含斜面培养基LB琼脂培养基(胰蛋白胨1％；酵母粉量相当稀少且分散，主要以重金属硒的化合物的形0．5％；NaCI1％；琼脂2％)；种子培养基LB液体培养式存在。研究发现，硒具有维持人类机体抗病能力，基(胰蛋白胨1％；酵母粉0．5％：NaCI1％)；液体发酵保护眼组织、肌肤、心脏和肝脏，防止体内产生毒性培养基碳源、氮源、Na2SeO、MgSO、CaCI2、K2HPO4／物质等重要功能，人体的贫血、冠心病、大骨节病、糖KH2PO；其他化学试剂国产分析纯。尿病、癌症等多种疾病都与人体内缺乏硒元素相立式压力蒸汽灭菌器、超净工作台上海博迅关】。许多食用菌具有很强的富硒能力，能

7、够将无机实业有限公司；LRH一250A一1／型生化培养箱韶关硒结合到大分子活性物质(如蛋白质和多糖)上，转市泰宏医疗器械有限公司；SKY一21IB型恒温培养振化为蛋白硒或多糖硒等有机形态的硒。因此，利用荡器江苏苏昆仪器有限公司；Spectrumlab752S型微生物发酵，开发出有机硒制品成为近年来研究的紫外一可见分光光度计上海棱光科技有限公司；蛋新热点。本研究旨在利用纳豆菌的发酵，将无机硒转白垂直电泳装置北京六一仪器厂；HHS型电热恒化为有机硒，并与纳豆激酶结合，得到