纳豆菌特性的研究-论文.pdf

《纳豆菌特性的研究-论文.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、第25卷第2期镇江高专学报Vo1．25No．22012年4月JournalofZhenjiangCollegeApr．，2012纳豆菌特性的研究鲍艳霞，陈钧(1．镇江高等专科学校4~：r-系，江苏镇江212003；2．江苏大学药学院，江苏镇江212013)摘要：筛选具有强溶栓活性等多种生物学功能的纳豆菌，并对其形态、生长特性等进行研究。分离出单茵落，进行菌种鉴定，并在不同条件下用测茵悬液吸光度的方法研究其生长特性。经茵落形态、茵体形态以及生理生化特性鉴定确定为枯草杆茵。该菌种在种子培养基中生长的最适pH值为6．0～8．0，生长温度为3O一45℃，耐盐性较高，在含7％以下

2、NaC1的盐溶液中均能生长。纳豆茵的生长条件适宜于下一步产纳豆激酶的研究。关键词：纳豆茵；茵种鉴定；生物学特性中图分类号：$646文献标志码：A文章编号：1008．8148(2012)o2-oo51-03纳豆芽孢杆菌是由日本学者泽村发现并分1．2主要实验仪器和设备离¨出来的。经过多年的研究，纳豆菌的各种生理1)METTLERAE240分析天平。功能不断被发现。2)SPF．250B生化培养箱。纳豆菌属于需氧菌中的非致病菌，能分泌淀粉3)THZ一82B气浴恒温振荡。酶、蛋白酶、脂肪酶等多种酶类，具有分解蛋白质、碳4)LS—B50L立式压力蒸汽灭菌器。水化合物、脂肪等大分子的

3、性能，使发酵产品中富含5)SW-CJ-2FD超净工作台。氨基酸、有机酸、寡聚糖等多种易被人体吸收的物6)uV．2102PCS型紫外可见分光光度计。质，而且纳豆菌是以内生孢子的形式零星存在于动7)H66MC超声清洗101．1型不锈钢数显电热物肠道的微生物群落中，在不利的环境条件下能形鼓风干燥箱。成芽孢，将自己保护起来，能耐酸、碱、高温，并在肠2实验方法道上段迅速转变成具有新陈代谢作用的营养型细胞，可以抑制肠内异常发酵和痢疾杆菌的繁殖，促进2．1菌种的自然分离与复壮乳酸菌等益生菌的增殖，调节肠内微生态平衡，保证原理是，牛奶中含有丰富的酪蛋白，而纳豆菌的肠功能的正常j。因此，

4、研究纳豆菌具有很重要的代谢产物具有分解酪蛋白的能力，在菌落周围可形意义。成分解酪蛋白的透明圈，根据透明圈的大小和菌落的生长状况，挑选强壮的菌株。1实验材料用无菌水稀释菌体，用10倍稀释法稀释至1．1材料、试剂10稀释度，取10～，l0稀释度菌液各0．1mL涂1)纳豆菌，系在江苏大学药学院陈钧教授从日布于复壮平板。在37℃培养24h后观察平板透明本带回的纳豆中筛选得到的。圈情况，取透明圈直径较大且菌落形状正常者做菌2)脱脂奶粉、大豆购自市场。其他试剂为国产种鉴定，并转接斜面培养基保藏。分析纯。2．2茵落形态鉴定3)培养基有斜面与平板培养基、种子培养基、鉴定菌落的形态、大小

5、、边缘、表面、凸凹度、透复壮培养基、糖发酵培养基、柠檬酸盐培养基等。明度等。收稿日期：2012一O1—06作者简介：鲍艳霞(1968一)，女，江苏泰州人，副教授，硕士，主要从事药学研究；陈钧(1947一)男，安徽当涂人，教授，博士生导师，主要从事天然药物活性成分提取分离纯化技术及工程研究。·51·2．3菌株培养特征央颜色深于边缘部分(如图1所示)，菌落直径为根据《微生物学实验》的要求，对分离的菌株2—5mm。进行革兰氏染色等试验。2．4生理生化特征微生物生化反应是指用化学反应来测定微生物的代谢产物。生化反应常用来鉴别一些在形态或其它方面不易区别的微生物。因此，微生物生化

6、反应是微生物分类鉴定的重要依据之一。依据《常见细菌系统鉴定手册》]，对菌株进行过氧化氢酶的测定、糖酵解试验、IMVIC与硫化氢试验、V—P试验等。2．5环境因素对菌种的影响根据《微生物学教程》，对菌种进行温度、pH图1纳豆茵的茵落形态值、盐度等的耐受性试验。2．5．1菌种对温度耐受性实验3．2菌体特征用牛肉膏蛋白胨培养基在水浴上进行试管液体1)杆状，长2．0m，宽0．7～0．8m。培养，分别对菌株在温度为1O～70℃时的生长情况2)染色均匀，革兰氏阳性。进行测试，结果见表1。3)具有鞭毛。2．5．2pH值耐受性试验4)芽孢中生，椭圆形，不明显膨胀，具有运用牛肉膏蛋白胨培

7、养基进行液体培养，分别对动性。菌株在pH值为3，4，5，6，11时的生长情况进行测3．3液体培养特征试，结果见表1。普通肉汁培养基37℃静置培养24h，培养液较2．5．3盐度耐受实验清，液面上形成一层白色菌膜，没有气泡。用牛肉膏蛋白胨培养基进行液体培养，调节培3．4生理生化特性养基中NaC1的含量，观察盐度为2％，5％，7％，对上述菌株进一步作生理生化试验。结果列于10％时菌株的生长情况，结果见表1。表1中。2．6粘性拉丝的产生表1纳豆菌的生长特性将大豆浸泡过夜，取出沥干后，放入搪瓷盘中，性质(properties)纳豆菌枯草芽孢杆菌高压