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《木瓜蛋白酶水解蛋白质的PH值变化与溶性蛋白的关系-论文.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、1)2第n卷第期周口师专学报自然科学版年月4oonorooo`rornsuNNVT11)2lClklltlni1木瓜蛋白酶水解蛋白质的值变化与溶性蛋白的关系谭光轩)生物系,,十,。摘要理论上蛋白质水解时会有授基和氨基产生而羚墓会电离产生H使PH值下降,,。:,,由此设想随着水解反应的进行PH值不断下降实验证明随酶浓度上升豆浆浓度下降.,,.,起始PH值降低和温度上升PH值下降速度加快即水解速度加快在酶解15小时后对可.,,,溶性蛋白进行测定发现随酶量升高(1一75写)浆浓度下降(7一1%)可溶性蛋白含量增..,,,加水解产物增加即水解速度增加这与P
2、H值从9降到63的规律相符合所以PH值变化,。表现了可溶性蛋白变化可用PH值作酶解反应程度的指标,,关键词大豆木瓜蛋白酶可溶性蛋白一生_.口网.前..`二1,、、。`仁硕〕57酶水解蛋白是大豆蛋白应用的重要分支在食品医疗造纸等方面都有应用。5,、〔〕8年美国就有酶解法水解大豆蛋白的研究国内起步较晚7年有枯草杆菌ASI39碱。,性蛋白酶应用于啤酒的研究目前蛋白酶水解法的研究着重于酶的选择酶解反应的最适,,,温度产品溶解性的提高等方面近年来固相化酶技术和膜技术也在水解蛋白上有应。,,,用s[]酶法提取大豆蛋白最重要的因素是时间时间太短水解不足产率降低时
3、间太长有,,,,苦味小股肤段产生成本升高〔习文献中对终点的确定多凭经验对终点的理论如PH值在反应中的变化,蛋白质变化与终点的关系研究却很少,同时利用木瓜蛋白酶制造水解蛋白在国内研究较少。1主要设备与试剂;;G一一0;0一一;大豆木瓜蛋白酶考马斯亮兰25稻津UV一一1220分光光度计811;CM一一12CC型习;8;HG一一303;型PH计0浆机0型离心沉淀器电热恒温培养箱_,01。7;81H型恒温磁力搅拌器粉碎机:收稿日期94一03一16一.3加,~.~.~~~~~~~湘`.一2方法:(l)流程图..一大豆君冬豆浆少州曳调PHg代奥户反应液井调PH
4、4:一45双匀系休退离心清液干燥阵...~卜~_、、一补__产品lHCL__L沉捉~⋯~调FH7~过滤,,。;我在实验中省略脱脂试制得全脂豆浆省略干燥制得产品只测蛋白质变化:,。(2)制浆粉碎机把大豆打成小于40目的颗粒加水后用匀浆机匀浆一层纱布过滤,,。后得一到豆浆减去滤渣固形物重量算出豆浆浓度.:,,。(3)反应10%豆浆(或稀释)调PH值为90加酶保温..:,,(4)反应终点豆浆问题讨论之后l1[提到45℃PH值90开始15小时后达PH值..。。,。70为终点升温终止反应本实验以15小时为终点马上处理.:,,;4(5)反应液处理取lml稀释1
5、0倍过滤待比色其它反应液调PH值为2一一..,,,。453000转离心5一10分钟取上清液0iml待比色.:,,。(6)沉淀处理取出沉淀定容Zoml调PH值为70,稀释10倍过滤待比色:,。n(7)蛋白质含量测定按考马斯G一一250法用590m处比色测定...:,(8)PH值荆定用PH值40和70的缓冲液标定PH计后以PH值70为标准液。测待定液PH值3结果与讨论.31不同酶呈的影响,,。在酶促反应中在一定底物浓度范围内反应速度与酶浓度成正比实验了不同酶浓...。,,,,度与PH值的关系发现酶浓度越高(5。%75%10。%)PH值下降越快即水解速度
6、..。:,,,越快达到PH值为70的时间10%为180分钟75%为20分钟5%为215分钟如图l阳位旅圣卜以口卜挤`口石、,/命一一、二念之之.乒才}可〔力)石口z义oj匆少相.,,图l不同浓度的酶在反应中PH值经(浆浓度5%温度3Q℃PH值始90)..,,同时不同酶量在其它条件相同时对比15小时后可溶性蛋白变化发现在75%,。酶干重豆干重有最高值如表1,,表1不同酶量蛋白质量的变化(浆浓渡5%温度30℃始PH依,的酶量反应液上清液:%OD值蛋白质(g)OD值蛋白质(g)OD值蛋自质气g).。.....1003840102005914670187}
7、。05。.......250384010200280747027();尹「)::{.....300460013300010227.0生7`{伙岁仁..。.,.,,50041701110069157001SG050.......,7505220139000802120282!0075.,实验测定了原浆蛋白质为0091(g)/每克豆干重经对比发现溶出蛋白质分别增加..:。112;2512;346;5一21;75-522%了%一一%%一一%%一一%%一%%一可挤性,,蛋白增加是因为酶量增加使达到平衡的时间提前而在同一时间测定时必然反应速度大。。的溶出蛋白
8、多与PH值与酶量的关系相符.、32不同浆浓度的影响、:,,:从图2图3可看出浆浓度越低达到平衡的时间越短达到平衡的时间分别
