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《木瓜蛋白酶水解大豆分离蛋白的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、食品科学一总木瓜蛋白酶水解大豆分离蛋白的研究肖凯军高孔荣曾庆孝华南理工大学食品系摘要大豆分离蛋白经过加热预处理,木瓜蛋白酶酶解后,水解度比未处理提高到倍,最佳处理条件为℃,。水解度的变化和大豆分离蛋白的含量变化有关。通过极差分析木瓜蛋白酶水解大豆分离蛋白正交实验,结果表明最佳水解条件为,,温度,反应时间。通过一电泳分析水解物得出大豆蛋白的成分和的酸性亚单位容易被木瓜蛋白酶作用,的碱性亚单位由于被酸性亚单位包裹较难水解,酶解物的分子量为万以下。关锐词木瓜蛋白酶大豆分离蛋白水解反应一凝胶电泳,一分子量标准前言,一,,一,为和,木瓜蛋台酶是一种琉基蛋白酶作用的底,公司〕,。,公,‘。,。二」
2、司〕其余皆为分析纯产品物较广泛也具有脂酶的活力在食品工业、,主要仪器上木瓜蛋白酶主要应用于肉的嫩化啤酒的“一,澄清等方面。由于大豆蛋白高度结构化,形成恒温水浴锅士离心机型,,坚实的球形结构,不规则结构占,这种牢精密计微鼠凯氏定氮仪电泳仪固的结构几乎不为木瓜蛋自酶所水解,对大豆班·。典型的酶解反应川蛋白的消化结果较差川木瓜蛋白酶在我国南·方资源丰富,对于木瓜蛋白酶的提取和生产工大豆分离蛋白溶解于水中形成,,艺已经,的溶液经过一定时间加热预处理恒温搅拌比较成熟但是对于木瓜蛋白酶水解大,,豆蛋白的应用研究尚不完善,无比较系统理论后调值至适当值加入一定比例蛋,研一、一白酶后开始反应,以砂拼滴定
3、奔价代,保持值不变值变功范围士反应本文对大豆分离蛋自进行适当的加热变性一,,,定时间后取溶液酶解液在℃维处理提高了木瓜蛋白酶水解大豆分离蛋白的。,,持而放入冰箱以备分析能力研究了水解大豆蛋白的最佳工艺探讨水解度的测定法川了水解过程中大豆蛋白分子特性的变化和作用,。酶解物加入肠溶液机理模式混合振荡,在月离心,取二清材料和方法,液蛋白质总氮和七清液可溶性氮由微量定氮凯氏法测得。实验材料一又‘大豆分离蛋白蛋白质含量只为洋鲁,木瓜蛋白酶紫外分光光度法测得活大豆蛋自酶解液中毛可溶性,,”力为万一琉基乙醇氮产品,考马斯亮蓝〔一七人,上海生·反应前大豆蛋白液中可溶化试剂,,日本京都厂单体聚丙烯酞胺性
4、氮、,,。人豆株式会社甲又双丙烯酞胺德国蛋自中总氮食品科学创总·一凝胶电泳分析着的基团完全暴露出来。用板状一凝胶不连续电泳法分,葱哪为了探索一变性程度寻找最佳,。,又研究,离蛋白质和酶解物并测定其分子量单体丙变性温度和时间了在℃℃加热,,。烯酞胺与交联剂甲叉双丙烯酞胺光照聚合形时基因随时间的变化规律见图。,成凝胶分离胶浓度写交联度浓缩胶,交联度。澳酚蓝为前沿指示剂。广气’一电泳条件点样量为每孔,浓缩胶时,分离胶。电,泳后等到指示剂澳酚蓝达到离下缘,。只有时电泳结束染色液考马斯亮蓝,定容,在进行染色,然,后用洗色液已醇溶液加入冰醋酸,,分和水进行褪色直到背景色完全褪,。℃去最后记录拍照经
5、加热处理旧改戈互习不经加热处理结果与讨论圈一不同加热沮度对大豆分离蛋白水解度形响预处理对大豆分离蛋白酶解的影响大豆球蛋白分子具有相当紧密的立体结,。构其构造破坏程度与酶分解速度成正比所‘确口人,以在酶解大豆蛋白时必须采取适当加热变广水,。性处理破坏这种结构提高水解速度‘,咬、大豆分离蛋白中和这两种蛋白质,呈,日一的结构一螺旋结构的占一写结、、卜构占“一,‘不规则结恢占五写币‘构绪,呈逆平行结构即球蛋白分子的乖规则结构部厂’,时询时分折叠成为非常坚实的三级结构进而形成复,一卜一一杂的四级结构这种极其致密的结构对酶的分一,解。蛋白质的变性,实图大豆分离蛋白的基团在加热中的变化必然具有很强的
6、抵抗能力一,’,’,质上就是未变性蛋白分子的二级、三级结构受从图可以看出在时,到破坏,使蛋白质分子结构发生变化。基团在之内略有增加随着时间的进行,,,。基团又减少这可能是由于大豆蛋白在热的大豆分离蛋白分别在℃℃‘,,,,一,变性作用下亚基开始解水溶液加热立体结构变得松驰,,蒸汽处理,然后进行酶解,酶解条件离使基团增加然后又通过二硫键或疏水。,,时,,。结作用形成聚合体因为没有观察不溶性大分子,果见图。出现因此可以断定大部分形成的是可溶性聚,从实验结果看出,。一℃加热时大豆合体只有一小部分形成不溶性聚合体实验结果饲勃电一致。的。亚单位分离蛋白的水解度略有增加时开始水八,一达到最高,一一,
7、解度增加较快和的亚单位在热作用下引起离解然后形。‘‘,,成可溶性大分子主要是士招的擞性亚单位和略有下降在高于℃时原先被掩伏食。一总品科学日亚,,。的单位通过疏水键结合在一起碱性亚加量反应时间。单位之间也可通过二硫键形成可溶性聚合物一凝胶电泳分析酶解物分子为了进一步确定加热时间对水解度,影响量的变化,,,,,,,,,,在望分别在在最佳条件下即一,一,测定其时间与的关系酶解条件用木瓜蛋白酶水解大豆分离蛋白。,,同上用一电泳分析了水解产物见表不同加热
