两种玻璃化冷冻方法在大鼠卵巢组织冷冻中的应用效果观察-论文.pdf

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1、解放军医药杂志2015年5月第2Z卷第!!垒!::型:·9··论著·两种玻璃化冷冻方法在大鼠卵巢组织冷冻中的应用效果观察李冬秀,耿杨柳,吴小华,于晓惠,张敏,徐清华,许鹏宇[摘要]目的比较直接覆盖玻璃化冷冻(directcovervitrification,DCV)及常规玻璃化冷冻(conventionalvitrifi-cation,cv)在大鼠卵巢组织冷冻中的应用效果。方法将雌性Wistar大鼠30只随机分为A、B、C组,每组1O只,切除大鼠双侧卵巢组织。A组为对照组,B组和c组分别应用CV和DCV冻存2周。复苏后观察3组卵泡的形态,并用末端脱氧核酰转移酶介导的脱氧尿苷三磷酸

2、标记实验(TUNEL)检测各组卵泡的凋亡率。结果A组各级卵泡形态正常;B组卵泡形状不规则,卵母细胞核固缩;c组较大的窦状卵泡损伤。除C组原始卵泡外,B组和c组形态正常的各级卵泡比例均低于A组(P<0.05);C组形态正常的各级卵泡比例高于B组(P<0.05)。B、c组卯泡凋亡率高于A组,且c组低于B组(P<0.01)。结论DCV较CV卵巢组织效果更好,可以有效保存卵巢组织中的原始卵泡。[关键词】卵巢;玻璃化作用;低温保存;大鼠,Wistar[中国图书资料分类号]R715;R一332[文献标志码]A[文章编号]2095—140X(2015)05—0009-04[DOI]10.396

3、9/j.issn.2095—140X.2015.05.003ComparisonofEffectsofTWOKindsofVitrificationMethodsinFreezing0varianTissuesinRatsLIDong—xiu,GENGYang—liu,wuXiao·hua,YuXiao—hui,ZHANGMin,XUQing—hua,XUPeng—yu(CenterofRe—productiveMedicineCenter,BethuneInternationalPeaceHospitalofPLA,Shijiazhuang050082,China)[Abstr

4、act]0bjectiveTocomparetheeffectsofdirectcovervitrification(DCV)andconventionalvitrification(CV)infreezingovariantissuesinrats.MethodsAtotalof30maturefemaleWistarratswererandomlydividedintogroupA,BandC(n=10foreachgroup),andbilateralovariantissuesofallratswerecutof.GroupAwasthecontrolgroup;grou

5、pBandCwererespectivelyfreezedusingCVorDCVmethodfor2weeks.Afterthawed,inthethreegroups,thefollicularappearanceswereobserved,andfollicularapoptosisratesweredetectedusingTUNEL(terminaldeoxynucle—otidyltransferase-mediateddUTPnickendlabeling)method.ResultsTheappearancesofeachgradewerenormalingrou

6、pA;thefollicularappearanceswereirregularandoocytekaryopyknosiswasfoundingroupB;thebiggersinusoidO—varianfolliclesweredamagedingroupC.ThenormalratesoffollicularappearancesinallgradesofgroupBandCweresignificantlylowerthanthoseingroupAexceptforthatofprimordialfolliclesingroupC(P<0.05);thenormalr

7、atiosoffollicularappearancesinallgradesofgroupBweresignificantlyhigherthanthoseingroupB(P<0.05).Thefollicu—larapoptosisratesingroupBandCweresignificantlyhigherthanthatingroupA,andtherateingroupCwassignifi—cantlylowerthanthatingroupB(P<0.01).C

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