小鼠卵巢组织冷冻保存方法的初步研究

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1、京碱抑皆ｆ像博±研究生学位论文北京协和医学院研究生院学校代巧：１００２３Ｌ‘学Ｊ：Ｂ２０１１００１（）６８博±学位论文专业学位小鼠卵巣组织冷冻保存方法的初步研究Ｔｈｅｓｔｕｄｏｎｃｒｏｒｅｓｅｒｖａｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｓｆｏｒｙｙｐｍｉｃｅｏｖａｒｉａｎｔｉｓｓｕｅ所院：北京协和医院姓名：朱夏琴指导教师：郁埼教授导师小组：孙正怡副教授学科专业：妇产科学研究方向：生殖内分泌完成日期：２０１５年４月北京协和医学院北京协和医院博上学位论文目录目录中英文缩写词表１

2、中文摘要２２小鼠卵巢组织冷冻保存方法的初步研究Ａｂｓｔｒａｃｔ３Ｔｈｅｓｔｕｄｙｏｎｃｒｙｏｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｏ田ｍｅｔｈｏｄｓｆｏｒｍｉｃｅｏｖａｒｉａｎｔｉｓｓｕｅ３前言５实验材科７实验方法９一、小鼠动情周期的宫颈粘液及阴道脱落细胞涂片观察９１０二、小鼠卵巢组织的获取与预处理冷冻复苏方案１０四、冷冻复苏后卵巢组织的培养１３１４五、卵巢组织冷冻复苏后行小鼠肾包膜下移植１６六、Ｅｚ水平的检测＾：：＞组织学分析１６八、原位杂交细胞调亡

3、检测１７实验结果１９讨论２５结论３０文献综巧３４女性恶性肿瘤患者生育功能的保存方法现状及研究进展３４致谢４８５０学位论文版权使用授权书５０化京协和医学院北京协和医陈蹲±学位论文縮与词表中英文缩写词表缩写词英文全称中文全称ＩＩＤＭＳＯ出ｍｅ化ｙｌｓｕｌｆｏｘｉｄｅ二甲基亚讽ＥＣＭｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｍａｔｒｉｘ细胞外基质ＥＧｅｔｈｙｌｅｎｅｇｌｙｃｏｌ乙二醇Ｅ］Ｅｓｔｒａｄｉｏｌ雌二醇ｃｏ－巧ｌｌ聚藤糖ＧｎＲＨ－ａｏｎａｄｏｇ

4、ｔｒｏｐｉｎｒｅｌｅａｓｉｎｈｏｒｍｏｎｅａｎａｌｏｕｅ促性腺激素释放激素类似物ｇｇＧＶｇｅｒｍｉｎａｌｖｅｓｉｃｌｅ生发泡ＨＥｈｅｍａ－－ｔｏｘｙｌｉｎｅｏｓｉｎ苏木精伊红－－－－ＨＥＰＥＳ４２Ｈｙｄｒｏｘｅｔｈｅｒａｚｎｅｅａｎｅｓｕｎｃ４－（ｙｙｌ）１ｐｉｐｉｔｈｌｆｂｉ径乙基曠嗦乙横酸ａｃｉｄＨＳＡｈｕｍａｎｓｅｒｕｍａｌｂｕｍｉｎ人血清白蛋白ＨＴＦｈｕｍａｎｔｕｂａｌｆｌｕｉｄ拟人输卵管液ＩＣＲＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＣａｎｃｅｒ民ｅｓｅａｒｃｈ美国癌症研究所ＩＣ

5、ＳＩＩｎｔｒａｃｙｔＱｐｌａｓｍｉｃｓｐｅｒｍｉｎｊｅｃ巧ｏｎ卵母细胞胞浆内单精子注射ＩＶＦｉｎｖｉｔｒｏｆｅｒｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ体外受精、试管婴儿ＩＶＭｉｎｖｉｔｒｏｍａｔｕｒａｔｉｏｎ体外成熟ＭＥＭｍｉｎｉｍｕｍ的ｓｅｎｔｉａｌｍｅｄｉｕｍ最低必需培养基ＯＨＳＳｏｖａｒｉａｎｈｙｐｅｒｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎｓｙｎｄｒｏｍｅ卵巢过度刺激综合征ｓｈａ－ＰＢＳｐｈｏｐｔｅｂｕｆｆｅｒｅｄｓａｌｉｎｅ麟酸盐缓冲液Ｐ民ＯＨ１２－ｒｏａｎｅｄｏ二ｉｌ丙醇，ｐｐＲＴ－ＰＣ民ｒｅｖｅｒｓ

6、ｅ－ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎＰｏｌｙｍｅｒａｓｅＣｈａｉｎ反转录聚合酶链式反应Ｒｅａｃｔｉｏ打ＴＵＮＥＬｔｅｒｍｉｎａｌｄｅｏｘｎｕｃｌｅｏｔｉｄｌＴｄＴ介导的ｄＵＴＰ缺口末端ｙｙｔｒ－ｔＴＰ－ａｎｓｆｅｒａｓｅｍｅｄｉａｅｄｄＵｂｉｏｔｉｎｎｉｃｋｅｎｄ标记技术ｌａｂｅｌｉｎｇａｓｓａｙ｜１北京协和医学院北京协和医院博丄－学位论文中文摘要中文摘要小鼠卵巢组织冷冻保存方法的初步研巧研究背景肿瘤患者经过手术或放化疗后生殖功能会受到明显影响，己经有多种方法能够对这些患者的性腺功能

7、进行保护，而在卵巢功能受损前进行卵巢组织的冷冻更适合于青春期前卵泡尚未发育成熟的患者、不能延误肿瘤治疗、激素治疗或促排卵有禁忌从及有切除双侧附件风险的女性患者，因此具有很大的潜在意义。卵巢皮质内具有大量的卵泡储备，原始卵泡因体积小、代谢率低等特征能够耐受低温损伤，在皮质冷冻中可Ｗ相对多地完好保存。目前的卵巢组织冷冻保存尚处于研巧阶段。从冷冻方法上讲，可从分为慢速冷冻和玻璃化冷冻。慢速冷冻是传统的冷冻方法，采用低浓度的冷冻保护剂从而降低细胞毒性，玻璃化冷冻因为降温迅速，组。织或细胞与冷冻剂接触时间短，则需要更高浓度的冷冻保护

8、剂和更快的降温速率一目前卵巢组织的冷冻方案尚无统意见，但多数取得临床活产的研巧采