蚕豆蛋白酶解工艺及响应面法的优化-论文.pdf

《蚕豆蛋白酶解工艺及响应面法的优化-论文.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、第13卷第5期中国食品学报V0l_13No．52O13年5月JournalofChineseInstituteofFoodScienceandTechnologyMaV2013蚕豆蛋白酶解工艺及响应面法的优化苏海玲张海英李红卫吕莹韩涛(北京农学院食品科学与工程学院北京102206)摘要以蚕豆为原料，水解度为指标，研究木瓜蛋白酶及Alkaline蛋白酶酶解制备蚕豆多肽的工艺条件。通过单因素试验．初步确定2种酶法的酶底比、温度、pH的试验水平。在Alkaline蛋白酶单因素试验基础上，采用中心组合试验和响应曲面分析法分析各因素对酶解反应的影响

2、．确定酶解反应的最佳工艺条件。结果表明：Al—kaline蛋白酶的酶解水平优于木瓜蛋白酶。木瓜蛋白酶解的参数是：pH6．5，酶底比8000u／g，温度65℃，在此条件下水解度为12．45％。Alkaline蛋白酶，各因素对蚕豆蛋白水解度的影响顺序为pH>酶底比>温度；响应面优化后的最佳参数为pH8．2，酶底比1978u／g，温度64℃，水解度预测值25．48％。验证试验的水解度为25．54％，预测值与试验值十分接近关键词蚕豆；木瓜蛋白酶；Alkaline蛋白酶；蛋白质水解；响应曲面法文章编号1009—7848(2013)05—0039—0

3、8蚕豆(ViciaFab。Linn．)，别名胡豆、佛豆、寒境污染的同时，浪费蛋白资源；在国外，蚕豆蛋白豆、南豆、夏豆和罗汉豆等，是一种重要的植物蛋质被广泛用于生产咖啡增白剂、肉制品填充剂及白资源，也是一种高蛋白、高淀粉、低脂肪同时富化妆品添加剂等，从而得到较好的利用。含纤维素、维生素、矿物质与其他营养物质的豆类本文采用木瓜蛋白酶和Alkaline蛋白酶分别食物。我国是世界上蚕豆栽培面积最大且总产量酶解蚕豆蛋白，以水解度(DH)为评价指标，采用最多的国家．占世界蚕豆生产的比重分别为43．82％CCD以及RSM分析各因素与响应值、各因素之间和

4、51．19％。另外，蚕豆是除大豆和花生之外，我国的相互影响．并对各因素进行优化，初步确定制备目前种植面积和产量最多的豆类作物l】-2]。蚕豆多肽混合液的最佳工艺参数，为蚕豆蛋白的豆类中蚕豆的蛋白质含量仅次于大豆，为深加工及高值利用奠定理论基础。25％～30％．显著高于其它植物蛋白源，其氨基酸组成接近人体和动物所需要的理想比例，且赖氨1材料与方法酸质量分数高出一般谷类3倍；蚕豆蛋白的第一1．1原料限制性氨基酸是含硫氨基酸，在蚕豆蛋白的氨基干蚕豆：市售。酸构成中，人体8种必需氨基酸所占质量分数为1．2试剂及仪器9．71％I3-51。鉴于蚕豆中

5、主要成分为淀粉，我国的蚕木瓜蛋白酶(800u／mg)、Alkaline蛋白酶(200豆主要用于生产粉丝、粉皮，部分用作生产味精、u／rag)，上海晶天生物科技有限公司；浓盐酸、氢氧酱油、豆酱等；其蛋白质部分随生产废水排出或小化钠、氢氧化钙、亚硫酸钠等试剂均为分析纯，中部分得以回收．用于制作饲料，这种模式在造成环国北京化工厂；磷酸氢二钠、磷酸二氢钠均为分析纯，北京世纪红星有限公司；Tris—base，上海丰翔收稿日期：2012—05—10生物科技有限公司。基金项目：功能(保健)食品产品开发及其生物活性研究电子天平．北京赛多利斯仪器系统有限公

6、司：(PXM2013_014207_000048)；农产品加工及贮B一260恒温水浴锅，上海亚荣生化仪器厂：FE一20藏工程北京市重点建设学科项目(PXM2013—型pH计，上海梅特勒托利多仪器有限公司；TDL一014207—000057)作者简介：苏海玲，女，1986年出生。硕士生40B离心机，上海安亭科学仪器厂；T6新世纪紫外通讯作者：韩涛可见分光光度计，北京普析通用仪器有限责任公司。中国食品学报2013年第5期1．3酶解底物的制备白)，本试验取查显蟹臼的h值为7．92；ol——蛮取市售干蚕豆500g，清水浸泡12h，去壳，用豆蛋白氨

7、基的平均解离度，试验条件下为0．89；0．5％的NaSO和0．01％的NaOH混合溶液浸泡计算公式为=10(pH-pK)67h，以提高蚕豆蛋白提取率，45clC干燥，粉碎过10(pH一pK)_pK=7．8+—2400(298-T)60目筛。称取适量蚕豆粉，按固液比(g／mL)1：15加入0．16g／L的Ca(OH)，搅拌均匀，用1mol／L式中，pH——反应体系的pH值；pK——反应HC1调节溶液pH至8．O，置于恒温水浴锅中50℃条件下释放出的一NH，+的平均解离常数浸提20min．混合液3000fmin离心10min，收集上清液，用1

8、mol／LHC1调节溶液pH至蚕豆蛋白2结果与分析等电点pH4．2，边加酸边搅拌，混合液4000r／min2．1单因素试验离心10min，收集沉淀物，所得即为蚕豆粗蛋白『9_]。2．1．1木瓜