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《均匀试验设计优化金银花总黄酮的提取》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、2010年第2期文章编号:1005—3387(2010)02—0028—29均匀试验设计优化金银花总黄酮的提取胡海山朱群英左美玲(1.江西省分析测试研究所,南昌330029;2.南昌市疾病预防控制中心,南昌330006)摘要:本试验采用均匀试验设计法优化金银花中总黄酮提取条件,考查了回流时间、回流温度、提取溶剂乙醇水溶液的比例及提取次数4个因素对金银花中总黄酮提取的影响,以总黄酮的含量为评价指标进行(9)试验,确定最佳提取条件。结果表明,总黄酮提取最佳条件为提取时间1h、提取温度85%、水醇溶剂比例70
2、%、提取次数2次。本研究还进行了超声提取比较实验,为建立的实际工艺的提取方法提供了理论依据。关键词:均匀试验设计;金银花;总黄酮;提取中图分类号:065文献标识码:A醇和乙醇、亚硝酸钠、硝酸铝和氢氧化钠为分析纯,0引言自制超纯水。1.2总黄酮的含量测定金银花主要的化学成分包括:有机酸类、黄酮1.2.1标准曲线的制备类、三萜类和挥发油等化合物。金银花中含有黄酮准确称取105℃干燥至恒重的芦丁标准品类化合物:木犀草素一7一葡萄糖甙、槲皮素一3—050mg于50mL容量瓶中,加60%乙醇溶液超声溶一一D一葡萄
3、糖甙、金丝桃苷等。现代医学研究表解,冷却,定容。吸取芦丁标准溶液0mL、0.50mL、明:黄酮类化合物具有降低心肌耗氧量,使冠脉、脑1.OOmL、2.OOmL、3.00mL、4.OOmL(相当于芦丁血管血流量增加,抗心律失常、软化血管、降血糖血0、501.~g、100g、200Ixg、3001.zg、400txg),移入10mL脂等作用。同时它还是一种天然的抗氧化剂,具有比色管中,加入60%乙醇溶液至5mL,各加5%亚清除人体中超氧离子的自由基,抗衰老,增加机体免硝酸钠溶液0.3mL,摇匀后放置6rai
4、n,加入5%硝疫力的生理活性。酸铝溶液0.3mL,摇匀后放置6rain,加4%氢氧化国内外对黄酮提取方法,可采用热水提取、碱液钠溶液4mL,用60%乙醇定容至刻度。摇匀,放置提取、丙酮提取、微波萃取、乙醇浸提取和超声波提15min,于510nm波长处测定吸光度,以零管为空取等方法¨J,这些方法各具优缺点,可根据实际条白,以芦丁含量(g)为横坐标,以吸光度为纵坐标件进行选择。而在实际工艺中以水提取和醇提取居绘制标准曲线,得回归方程为:A:0.0101C一0.多,且水提取或水醇提取的工艺条件对提取效果影00
5、11,相关系数r=0.9999。响较大,因此,本试验采用(9)均匀试验设计,试1.2.2样品的测定验中选择回流时间、回流温度、提取溶剂乙醇水溶液准确吸取1~5mL提取液,移入10mL比色管中的比例及提取次数4个因素考查对总黄酮提取率的加入60%乙醇溶液至5mL,再按1.2.1项下测定其影响,寻找出金银花中总黄酮较佳的提取工艺条件吸光度,计算得总黄酮含量。参数,建立提取方法简便、可靠,可为生产工艺提供1.2.3总黄酮的提取理论依据。试验中选择回流时间(A)、回流温度(B)、提取溶剂乙醇水溶液的比例(C)及
6、提取次数(D)4l实验部分个因素考查对黄酮提取率的影响,见表1所列。1.1仪器、试剂和样品根据因素水平,按照(9)表均匀设计安排试梅特勒一托利多AL204型电子天平、KQ一验,实验中称取同一样品9份,每回流一次加5200DE型超声波清洗器和721型分光光度计。50mL乙醇水溶液,合并提取液,在回流的水浴中芦丁对照品购自中国药品生物制品检定所,甲挥干溶剂至约50mL,最后定容至50mL,在用提~28一取液按1.2.2项下进行总黄酮的测定,均匀试验2。2超声试验比较结果见表2。本部分试验中采用超声提取方式与
7、回流提取做实验比较,选用最佳提取参数,即超声提取时间1h、表1因素水平表提取温度80c《=、提取溶剂70%乙醇溶液。超声提因素水平取后测定其总黄酮含量为20.4mg/g,略低于回流A时间(h)l23456提取方式。提取时间大大缩短,产率较高,且设备简B温度(℃)30405060708090100单、操作方便,是提取金银花中黄酮类化合物的一种C比例(%)O204060801oo有效方法。D次数(次)1234表3验证试验安排及结果表2均匀试验安排及结果因素总黄酮含量试验号A(h)B(cC)C(%)D(次)m
8、g/g因素总黄酮含量试验号A(h)口(℃)C(%)D(次)mg/g1l8060222.1114060319.6218070223.2226020l13.2316080221.7338040321.144loo0l12.23结论553020412.3本部分实验探讨了金银花中总黄酮的提取,6650100221.5以总黄酮的含量为评价指标进行U(9)试验,优71700412.8化金银花中总黄酮的最佳提取条件。试验结果表明,金银花中总黄酮提取的最佳
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