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1、468中国实验血液学杂志JournalofExperimentalHematology2006;14(3):468-470文章编号(ArticleID):1009-2137(2006)03-0468-03论著白血病细胞可变铁池的检测及其意义12233贾国存,高举,廖清奎,李丰益,袁粒星,何斌12郑州市儿童医院血液科,郑州450053;四川大学华西第二医院儿科、血液肿瘤3研究所,妇儿中心实验室,成都610041摘要为了研究细胞可变铁池(labileironpoo,lLIP)的检测方法
2、,用不同浓度的去铁胺(DFO)与K562及HL-60细胞共同培养0、6、12、24、48小时,用钙荧光素(caicein)负荷K562及HL-60细胞,荧光分辨仪检测细胞荧光量;用快速铁螯合剂螯合铁,使恢复荧光,然后计算2次荧光差值。结果表明:浓度为50和100mol/L的DFO作用于K562及HL-60细胞12小时后,荧光值明显高于对照组(P<0.05),且LIP的荧光差值(LIP)随DFO作用时间的延长及浓度增加而降低,即呈一定的时间及剂量依赖性。结论:DFO通过螯合细胞内铁降低了白血病
3、细胞LIP;calceinAM荧光可作为检测细胞LIP变化的比较可靠的方法。关键词铁;去铁胺;K562;HL-60中图分类号R733.7文献标识码ADetectionoftheLabileIronPoolinLeukemiaCellsandItsSignificance12233JIAGuo-Cun,GAOJu,LIAOQing-Kui,LIFeng-Yi,YUANLi-Xing,HEBinDepartmentofPediatricHematology,ZhengzhouChildr
4、enHospital,Zhengzhou450053,China;1DepartmentofPediatrics,2InstituteofHematologyandOncology,3CentralLaboratoryforWomenandChildren,TheSecondHospital,SichuanUniuersity,Chendu610041,ChinaAbstractToexplorearapidandeasymethodtodetectlabileironofpool(LIP)
5、incells,HL-60andK562cells6wereculturedataconcentration110/mlinRPMI1640containing10%hea-tinactivatedfetalbovineserum.Theirondeprivationwasinducedbyaddingdesferrioxamine(DFO)10-100mol/Lfor0-48hours.TheintracellularLIPwasmeasuredbyprobecalcein-AM.Calc
6、einfluorescencewasmonitoredin1420multilabelcounter.TheresultsindicatedthatwhenHL-60andK562cellswereincubatedwithdifferentconcentrationsofDFO,thecalceinfluorescenceintensitywashigherthanthatofcontrolgroupat12,24and48hours(P<0.05).Fluorescencevalueofre
7、presentingLIPinDFOgroupswaslowerthanthatinthecontrolgroup.Inconclusion,DFOcandecreaseLIPinleukemiacells.Theapproachusedinthisstudymayprovideasimpleandreliablemethodfordetectionofintracellularironhomeostasis.Keywordsiron;desferrioxamine;K562;HL-60JE
8、xpHematol2006;14(3):468-470铁是细胞维持正常功能活动所必需的元素,但材料和方法过多的铁又可损伤细胞。细胞铁水平受铁代谢相关材料蛋白(转铁蛋白-转铁蛋白受体,铁蛋白)的共同调节细胞株人白血病细胞株K562为本实验室保存而维持平衡,其调节机制与胞浆铁调节蛋白与铁反株;HL-60细胞引自四川大学基础与法医学院细胞应元件的结合有关。虽然细胞内铁有不同的结合形分子生物学实验室。式和不同的配体,但目前认为能够反映细胞铁状态主要试剂及仪器钙荧光素乙酰氧基甲酯(calcein和
