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1、-国际遗传学杂志0灼兰曰2旦旦口玉置卫夕堡鉴里些匕丛」卫犯丝一呸旦皿巡些兰丝生丛些1·技术·与方法粪便不同保存方法对动物基因组提取效果的影响李娜李迪强王秀磊刘毅摘要】目的为了探索一种既能使野外采集的粪便样品保存完好,又方便带回实验室用于分子水平研究的粪便保存方法。方法本研究通过将普氏原羚的粪便在野外分别采取60℃干燥后低温保存,75,0%乙,,l、5%乙醇保存10醇保存直接低温(保温箱中加生物冰袋)保存在个月内个月、DNA,,。后8个月后对粪便进行抽提并将提取的DNA作为模板进行PCR扩增基因克隆测序结果短期内均可得到高质量的NA,DNA,,,D大小在23kb左右电泳带型整齐无降解线粒体的
2、扩增结果也完全一致,而用DNA。100%乙醇保存粪便的时间更为长久结论不同的保存方法提取动物基因组效果不一样。[关键词】粪便保存方法;DNA提取;普氏原羚TheEfl艳etofDifl记erntPreservationMethodsofFaeeeSonGenomicDNAExtareitonfromAnimalLI,.,2,。i一。ia,,,`一le,,Llviy’`eterinaci,,eunanicutu瓜刀咭似腮爪i(hTVe仃MedioCll聊ofhgrAlarl初esri:,,asa4一0128;2s:i:二;eers,eo,ronmen,an;ectio,:,neseeae硫c
3、h昭人nIofoFEl卿E二idporChiAd哪of..oFerst理,Be挤咭]00091,PRhCina)...rre.5},ona:i一aE一miaZ:erse二。tacoCidgnuthorlLD砰gn@foser’r,cn【Abstract】objecitveToifndamethodthatit15afeilitatedotpersevretheafeeesintheifeldeoeetion,an(tatit15asoeasytoeaae、tothereseareaoratormoeeuareveoeeesDNAll1hl哪b]hlb巧follllffasanlples.M
4、ethodsResPeetively,withthelowtempeartuerprese挥ationof60degeresdw,htepresevrationof75%ethano,tepresearionoetanoanreetowremperatureinteattemPetorangrelhvrf100%hlddil(harddih·oogieeeag,Wetopleseeteeeesomprzewas,5gazeeinteeoeoeetingeDNAbilalib)ervrhfafrlkillhifldfllThwasextaretedformfaeeessamplesinone
5、month,ifvemonthslaterandeihgtmonthslater,respeetively.The.extetionasatempatewasuser,geneeoningansequeneingesseresursarofDNAldfoPCRldRultThisowetattompateswereextetesueeessomteeeesinasort[ime,eDNAmoeeuarhdhDNAlardfullyfrhfahlTll.weighr15about23kb.hTeeleetrophoersisbeltsweretidy,withoutdegardationTh
6、eexPansionresultsofmitoehondriaaereomPletelyeonoistent.Withthe100%ethanol,theDNAsampleswillbepersevredforaonertime.onereneoreservaonavereeonresus.lgCelusionsThdifetmthdPtiwillhdifenltyxtacritlt【Keywords」presevrationmethodsoffaeee。;FaecalDNAextraetion;尸厂之召幼als凡i,sglleaez近年来,遗传因素在保护生物学及系统进化中破坏性的取样活动
7、.因而长期以来,对这些动物的。,。的作用受到普遍重视而要获取动物的遗传信息遗传结构及遗传多样性现状的研究一直都很薄弱。,首先必须采集含有遗传物质的分析样品由于珍稀粪便DNA分析技术以动物粪便为实验材料应用分濒危动物的种群生存状况相当脆弱,已不允许进行子生物学手段研究动物的DNA,从而获得动物有关,。[’’〕的遗传信息特别适宜于濒危动物的研究,.:o;基金项目国家自然科学基金项目(N30370217)濒危动物保粪便样品的采