资源描述：
《转基因植物外源基因的整合分析》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、转基因植物外源基因的整合分析?综述与专论?生物技术通报Bl0TECHNOL0GYBULLETlN2009年第1O期转基因植物外源基因的整合分析岳同卿郎志宏黄大防(中围农业科学院生物技术研究所,北京100081)摘要:外源基因表达的不稳定性和多样性是制约转基因作物育种研发进度的关键因素,外源基因的整合情况与外源基因的表达直接相关,充分了解外源基因的整合情况可为构建高效表达栽体,获得外源基因稳定一致表达转基因材料提供参考,同时为转基因作物的安全利用提供保障.就外源基因整合情况的分析方法,不同转化方法外源基因的整合特点及利用定点整合技术提高外源基因表达稳定一致性的研究进展作一概述.关键词:转基因植
2、物外源基因整合定点整合表达稳定一致AnalysisofForeignGeneIntegrationinTransgenicPlantYueTongqingLangZhihongHuangDafang(BiotechnologyResearchInstitute,ChineseAcademyofAgriculturalSciences,Beng100081)Abstract:Thevariabilityandinstabilityofforeigngeneexpressionwasthemainobstacleforthedevelopmentoftransgeniccropbreeding.
3、Theexpressionlevelsofforeigngenecorrelatedwiththeintegrationsituationoftheforeigngene.Fullunderstandingtheinte-grationfeaturesofforeigngenescouldprovidereferenceforconstructinghighexpressionvectorsandobtainingmorestableandconsist-enttransgenicplants,aswellasimprovingbiosafetyofgeneticallymodifiedcr
4、opstouse.Inthispaper,themethodsforforeigngeneinte-grationresearch,theintegrationfeaturesofdifferenttransformationmethodsandtheprogressofthesite—specificintegrationtechniquetoenhancethestabilityandconsistencyoftheforeigngenewerereviewed.Keywords:TransgenicplantsTransgeneintegrationSite—specificinteg
5、rationStableandconsistentexpression自1983年首例转基因植物问世至今,转基因植物的研究和应用发展突飞猛进.截至2008年,全球共有13大类转基因作物实现商业化种植,主要包括转基因大豆,玉米,棉花,油菜,南瓜,番木瓜,紫苜蓿,甜菜,番茄,白杨,矮牵牛,甜椒和康乃馨等,有25个国家开始商业化种植转基因作物,另外还有30个国家批准进口转基因种子,利用转基因技术培育作物新品种已经成为重要的育种手段.然而在转基因作物研发中,外源基因表达的不稳定和多样化一直制约着转基因作物的研发进度.外源基因的表达与外源基因的整合情况,即整合形式和插入位点直接相关,因此分析外源基因的
6、整合情况,可为构建高效表达载体,获得稳定表达外源基因的转基因材料提供参考,同时为转基因作物的推广及应用提供安全保障.1研究外源基因整合情况的方法对于外源基因整合情况的研究,目的不同,方法也有所不同.通过Southern杂交或是rea1.timePCR方法可对转基因拷贝数直接进行研究;利用中期染色体或DNA纤维进行荧光原位杂交(fluo—rescentinsituhybridization,FISH)可对外源基因在染色体上的整合位置和座位数进行研究;而对于外源基因整合位点的精确分析则要通过分析外源基因插入位点的侧翼序列来完成.目前分析已知基因侧翼序列的方法有很多,比较有代表性的方法有质粒拯救法
7、,反向PC_R法及热不对称交错PCR法.收稿El期:20094)7—23基金项目:国家重点基础研究发展计划(2009CB118902),国家自然科学基金(30771383),转基因生物新品种培育重大专项资助项目(2008ZX08003.001)作者简介:岳同卿(1983-),女,山东人,博士研究生,研究方向为植物基因工程;E-mail:yuetq@mail.1as.ac.an通讯作者:黄大畴,研究员,从事农业
