海洋生物技术及应用.ppt

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1、海洋生物技术及应用遗传育种；海洋天然产物介绍；海洋生物的细胞培养和生物反应器；人类活动对海洋生物的影响和作用。遗传育种性别控制；转基因鱼；不育技术；克隆鱼。性别控制为什么控制性别？？？不同性别的动物其生长速度不同；牙鲆、真鲷、鲈鱼、虹鳟、大马哈鱼、对虾等，都是雌性个体比雄性同龄个体大；罗非鱼相反，雄鱼比雌鱼长得快；雌性鲻鱼的经济价值是雄鱼的7~8倍；有选择地进行单性动物养殖，可以大大提高产量和经济价值；性成熟之前，鱼类的性别很难辨别。雄的挑出来扔掉，雌的留下？？？鱼类的性别决定一部分鱼的雌性性染色体为XX，称“雌性同型配子动物”或“雌性同配

2、动物”；雄性性染色体为XY;也有雌性个体性染色体为ZW，称“雌性异配动物”；雄性性染色体为ZZ。如：金黄罗非鱼。全雌鱼的培育（雌性同配）孤雌生殖：卵子不经过受精，便直接发育成个体的生殖方法。如：蚜虫、卤虫、新月鱼。人工诱导雌核发育技术；性激素诱导；假雄鱼与雌鱼交配产生后代。人工诱导雌核发育始于20世纪50年代；目前已有鲤科、鲑科、鲽科和鲷科等重要经济鱼类中已开展了雌核育苗并取得成功；作用：性别控制、建立纯系。人工诱导雌核发育流程精子紫外照射无核精子雄鱼雌鱼卵子假受精第一次卵裂温度处理纯合二倍体培养全雌后代两个重要步骤诱发卵子雌核生殖；雌核生

3、殖卵子的二倍化。诱发卵子雌核生殖Coγ射线、紫外线和化学药物灭活精子，使其遗传物质失活但是保持与卵子结合的能力；国内大都用紫外线灭活精子；但是不同物种的精子其紫外线照射的强度、照射距离和时间都不同，同种物种的精子，其照射距离、照射、照射强度不同，照射时间也不同。如：当照射距离在6-11cm之间时，距离每增加1cm，照射时间就要增加2min左右；当照射距离不变时，用两支30W的紫外灯比用1支灯管的照射时间缩短近一半。雌核生殖卵子的二倍化温度处理(冷休克或热休克)、静水压和化学药物；常用方法：寒冷水域的鱼，如大马哈鱼等，用28~30度高温刺激十

4、几分钟（热休克）；暖水性鱼类，如罗非鱼，用0~4度低温刺激（冷休克）；人工诱导雌核发育流程精子紫外照射无核精子雄鱼雌鱼卵子假受精第一次卵裂温度处理纯合二倍体培养全雌后代激素诱导性腺未分化之前，投喂雌激素，可使雄鱼性别反转为雌鱼；性腺未分化之前，投喂雄激素，可使雌鱼性别转变为雌鱼；激素诱导与正常交配结合雌仔鱼雄激素假雄鱼雌鱼精子卵子全雌后代全雄鱼的培育（雌性同配）超雄鱼雌鱼精子卵子受精卵全雄鱼超雄鱼的培育（雌性同配）超雄鱼的培育（雄核发育技术）；雌鱼雄鱼卵子紫外照射无核卵精子受精纯合二倍体雌鱼超雄鱼温度处理超雄鱼的培育（激素诱导与正常交配结合

5、）超雄鱼的培育（雌性同配）雄仔鱼雌激素假雌鱼雄鱼卵子精子受精雌鱼雄鱼雄鱼雄鱼贝类人工雌核发育二倍体的研究现状太平洋牡蛎、香港巨牡蛎、皱纹盘鲍、贻贝和地中海贻贝中成功诱导并获得了具有生活力的雌核发育二倍体，但还没有培育到成体的报道。国内，迄今未见有二倍体化的贝类雌核发育个体存活的报道。基因工程技术及应用已完成基因组测序的海洋生物褐藻水云；海绵；玻璃海鞘；佛罗里达文昌鱼；日本文昌鱼；象鼻鲨；香港巨牡蛎；半滑舌鳎；斜带石斑鱼，；大黄鱼；科目象鼻鲨石首鱼科大黄鱼鲈形目鲽形目鳎科：眼睛位于头的右侧。半滑舌鳎鱼旨科鲈形目聚合酶链式反应（Polymera

6、seChainReaction，PCR)1985年美国PE-cetus公司的人类遗传研究室的Mullis等人发明了PCR技术；1993年Mullis因PCR技术获得了诺贝尔奖；PCR原理示意图模板DNA加热，变性DNA双螺旋的氢键断裂，双链解离形成单链DNA温度下降，退火引物与模板DNA杂交引物延伸形成两条与模板DNA完全一致的DNA链经过若干个循环后，模板DNA大量扩增引物设计基本原则引物长度：一般以15~30bp为宜；引物扩增跨度：一般以大于200bp为宜；引物碱基分布：尽可能随机；引物碱基G+C含量：宜在45%~55%左右。引物内部不

7、应形成二级结构；引物的特异性；引物3’末端的碱基与模板DNA严格配对；3’末端的末位碱基最好选T、C、G，而不选A；引物5’末端的碱基没有严格的限制。已知基因组序列或EST序列>gi

8、83415155

9、ref

10、NM_001037706.1

11、Danioreriosomatolactinalpha(smtla),mRNAGTGTGTGTTGTGTGTGTGTTTGTAAAGCCGGCAAGTGACCATTGAGAAATCTGGGCAAAAATGAACACAGTTAAAGTTCTGCAGGTGTGTGTGTGTGTGCTGATTCTGGGTCAG

12、TTTTTGGTTTCGGGTGCTGTTCCTCTGGACTGTAAGGATGACGCTGGATCTCGATGTGCTTCGATCTCTCAGGAAAAGCTTCTGGATCG