临床医学毕业论文结肠癌患者外周血内皮祖细胞数量及其功能的变化.doc

《临床医学毕业论文结肠癌患者外周血内皮祖细胞数量及其功能的变化.doc》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、XX大学毕业论文结肠癌患者外周血内皮祖细胞数量及其功能的变化2014年6月25日结肠癌患者外周血内皮祖细胞数量及其功能的变化作者：姜振宇宋晓燕马宁姚程【摘要】H的观察结肠癌患者外周血内皮祖细胞(EPC)数量及其功能的变化。方法选择结肠癌患者32例和对照组34例，密度梯度法分离人外周血屮单个核细胞，分化培养14d后，采用RTPCR法检测内皮细胞特异性成分内皮源型一氧化氮合酶(ecNOS),胎肝激酶l(Flk1/KDR)的表达，采用Dil标记的乙酰化低密度脂蛋fl(acLDLDil)和FITCUEA1对细胞染色分别鉴定贴壁细胞为EPCo采用集落形

2、成试验、改良的Boyden小室及黏附能力测定EPCs的迁移和黏附能力。结果结肠癌患者外周血EPC数量明显增多，黏附能力，迁移能力异常增高。结论结肠癌患者EPC数量及活力均异常增高。【关键词】结肠癌；内皮祖细胞(EPCs)；血管生成[Abstract]ObjectiveToinvestigatechangesinthenumberandactivityofendothelialprogenitorcells(EPCs)fromperipheralbloodinthepatientswithcoloncanccr.McthodsPeriphera

3、lbloodmononuclearcellswereisolatedbydensitygradientcentrifugationfromcoloncancerpatients(n=32)andcontrolsubjects(n=34).Immunocytochemicalanalysiswasconductedafter14dinduceddifferentiation,theexpressionsoftheendothelialcellspecificcomponentsecNOSandflk1/KDRweredetectedwithRT

4、PCR,thecellswerestainedwithacLDLDilandFITCUEA1；EPCnumberandmigrationweremeasuredbycolonyformingunitEPCs(CFUEPCs)assay,modifiedBoydenchamberassay,respectively.EPCadhesionassaywasperformedbyreplatingthoseonfibronectincoateddishestocountadherentcells.ResultsThenumberofEPCsinco

5、loncancergroupwassignificantlyhigherthanthatincontrolsubjectsgroup.Inaddition,theadhesionandproliferationavtivityofEPCswithcoloncancerincreasedrespectively.ConclusionsEPCsnumbersandactivityareabnormallyincreasedinpatientswithcoloncancer.[Keywords]Coloncancer；Endothelialprog

6、enitorcells；Angiogenesis结肠癌在我国的发病率与死广率次于胃癌、食管癌、肺癌等常见恶性肿瘤,居第4〜6位，且其发病率有逐年丄升趋势（1〕。随着人们年龄的增长发病率有所增高。近年研究表明，血管内皮祖细胞（EPCs）出生后主要存在于骨髓，在某些情况下可以被动员到外周血，归巢到靶组织参与生理或（和）病理性血管形成。外周血EPCs参与肿瘤血管新生，而肿瘤新牛血管系统对肿瘤发牛、发展及转移起关键作用。本文拟通过观察结肠癌病人外周血EPCs的数量及迁移、黏附能力的变化，探讨其在结肠癌发病机制小的作用，为其治疗探索新的途径。1对象与方

7、法1」研究对象选择2007年10月〜2008年11月我院住院结肠癌病人32例，其屮男18例，女14例；年龄51〜73（平均59.5±12.9）岁；排除外伤、溃疡、视网膜病、近期外科手术、炎症、肿瘤等影响EPC疾病者，近3个月无急性心肌梗死发生，入选病人均未用过他汀类纱物。另选取我院体检健康者34例为正常对照组，其中男19例,女15例，年龄50〜75（平均60.5±13.1）岁。1.2EPCs分离、培养无菌环境取患者外周静脉血，用密度梯度离心法分离单个核细胞，加入M199细胞培养液重悬细胞，计数细胞总数并进行细胞活力鉴定。将其接种于包被人纤维连

8、接蛋白的培养皿，置于5%CO2饱和湿度培养箱屮培养。3d后换液,弃掉未贴壁细胞。此后每隔3d更换1次培养液。将EPCs诱导培养14d后，RTPCR法检测内皮细胞特异