copd并发肺动脉高压病人外周血内皮祖细胞数量和功能的变化论文

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1、COPD并发肺动脉高压病人外周血内皮祖细胞数量和功能的变化论文【摘要】目的观察慢性阻塞性肺疾病(COPD)并发肺动脉高压(PAH)病人外周血内皮祖细胞(EPC)数量和功能的改变,探讨其在COPD并PAH发病中的作用。方法选择非COPD非PAH(非COPD组)病人15例、COPD非PAH(COPD组)病人15例、COPD并PAH(COPD+PAH组)病人30例,用密度梯度离心法从外周血获取单个核细胞,将其接种在人纤维连接蛋白包被培养板上,培养7d后对贴壁细胞进行细胞化学分析。通过集落形成试验、改良的Boyden小室和黏附能力测定实验计数EPC的数量、测定EPC的迁移和黏附能力。结果与非COPD组

2、及COPD组相比，COPD+PAH组外周血EPC数量明显减少,黏附和迁移能力显著降低，差异有显著性（F=9.79～15.42,q=3.578～7.963,P0.05）；且EPC数量及黏附、迁移能力与肺动脉压力呈负相关（r=-0.87、-0.89、-0.93,P0.01）。结论COPD病人PAH的发生可能与循环EPC数量减少、迁移和黏附能力降低有关，EPC数量和功能可作为评价COPD并PAH病人预后的一项指标。【关键词】肺疾病阻塞性高血压肺性内皮祖细胞［ABSTRACT］ObjectiveToinvestigatethechangingofnumberandfunctionofendotheli

3、alprogenitorcells(EPC)inpatientsonaryhypertensivearterial(PHA)secondarytochronicobstructivepulmonarydisease(COPD).MethodsMononuclearcellsfromnonCOPDononuclearcellsperipheralbloodbyFicolldensitygradientcentrifugation.EPCnumberandmigrationeasuredbycolonyformingunitEPCs(CFUEPCs)assayandmodifiedBoyde

4、nchamberassay,.freeledbyreplatingthoseonfibronectincoateddishes,thenadherentcellsberofCFUandmigration,adhesionactivityofcirculatingEPCsinCOPDandPAHgroupberofCFU,andadhesionandmigrationactivityofcirculatingEPCs.ConclusionThenumberofCFUandmigratory,adhesiveactivityofEPCinpatientsonarydiseases,obstruc

5、tive;hypertension,pulmonary;endothelialprogenitorcells低氧性肺动脉高压（PAH）是慢性阻塞性肺疾病（COPD）发病过程中的中心环节,PAH的产生及严重程度明显影响着COPD和肺心病的病程及预后。近年来的研究结果表明,内皮损伤及功能障碍在PAH的发生、发展中扮演了重要角色。内皮祖细胞(EPC)不仅参与人胚胎血管生成,而且参与出生后血管新生和内皮损伤后的修复过程1～3。本文观察COPD并PAH病人外周血EPC的数量及迁移、黏附能力的变化，探讨EPC在COPD并PAH发病中的作用。现报告诉如下。1对象和方法1.1研究对象2005年10月～2006

6、年11月，选择我院住院COPD病人45例，男32例，女13例；年龄48～73岁.freelg/LHFN包被6孔板，每孔置入5×106MNC，孵育2h，收集未贴壁细胞（包括EPC），调整密度为每孔1×106细胞，置入包被有HFN的24孔板中，继续培养5d，计数每个样本中每孔的克隆数。1.2.5黏附能力检测7用1g/L胰蛋白酶消化、收集贴壁细胞，将同等数目的EPC接种在包被有人HFN的24孔培养板，培养30min，用PBS洗去未贴壁的细胞，计数贴壁细胞。1.2.6迁移能力检测8用1g/L胰蛋白酶消化、收集贴壁细胞，将EBM2培养液加入改良的Boyden小室（江苏海门麒麟医用仪器厂）的下室，将2×

7、104EPC悬浮在EBM2培养液后注入上室，37℃培养24h，刮去滤膜上面未移动的细胞，用甲醇固定，Giemsa染色，显微镜下随机选择3个视野，计数迁移到底层的细胞数。1.3统计学处理计量资料以±s表示，组间资料比较采用方差分析，相关性采用直线相关分析。2结果2.1EPC的形态与特征分离获得的MNC培养7d后形成了梭形的内皮样细胞。EPC具有EC的特性，吞噬DiLDL、结合FITCUEAI后