菊花的组织培养-学案.doc

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1、菊花的组织培养-学案专题3植物的组织培养技术课题1菊花的组织培养导学案课题重难点：重点：“愈伤组织”、“脱分化”等概念；植物组织培养的过程；影响植物组培的因索难点：组织培养的实验操作课题日标：知识目标:1、能准确说出“愈伤组织”、“脱分化”、“再分化”、“外植体”等概念2、能说出植物组织培养的过程3、知道影响植物组织培养的因素及其影响原理4、了解植物组织培养的实验操作过程能力目标:1、理解呢制母液的必要性，能利用提供的母液进彳J：MS

2、古

3、体培养基的恻制2、能规范、准确的进行外植体消毒、接种等操作3、尝试对自己所得培养结果进行评价，分析成功或失败的原因情感、态度、价值观1=1标：1

4、、通过菊花组织培养的实验，培养严谨科学的实验作风2、体会生命之美，进一步激发学习生物的兴趣学习过程：第一课时一、基础知识：植物组织培养技术:指在人工培养基上，离体培养植物的器官、组织、细胞等，并使其生长、增殖、分化以及再生长成植株的技术。1、植物组织培养的基木过程：知识回顾:1）细胞分化：在植物的个体发育过程屮，细胞在的过程；细胞分化的原因是。2）植物组织培养的原理是，即新知拓展：1）离体的植物组织或细胞，在培养了一•段时间以后，通过形成，其特点有。2）由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程，被称为细胞的。3）将愈伤组织继续进行•培养，又可以重新分化出叫。4）归纳植物组织培养

5、的基木过程：21）外植体的选取：1不同的植物组织，培养的难易程度差别很人；对于同一种植物材料，材料的等也会影响实验结果。对于菊花的组织培养，一般选用。2）培养基的营养条件：知识冋顾：培养微生物的培养基一般含有、、、等物质，有的还需加入。新知拓展：进行植物组织培养常使用培养基，其主要成分包括：人量元索，如微量元索，如有机物，如；往往还需要添加植物激索，如3）植物激素的浓度、使用先后顺序及用量比例等:知识冋顾:生长素的作用：；细胞分裂素的作川：。新知拓展:使用顺序实验结果先用生长索，后用细胞分裂索先用细胞分裂素，后用生长索同时使用生长索/细胞分裂索植物细胞的发育方向比值高比值低比值适中

6、4）其他环境条件：除了上述因素外，、、等坏境条件也很重要，进行菊花组织培养时，一•般将pll控制在，温度控制在，并且每日用日光灯照射。第二课时二、实验操作：说明：由于菊花要9月上市，本实验用胡萝卜的形成层代替菊花茎段进行实验，在激索用量、接种操作、培养条件等方面与菊花的组织培养略有差异。胡萝卜的组织培养操作流程：1、制备MS固体培养基：（参见课本84页MS培养基配方）1）配制各种母液：（教师L1配好）母液1：人量元索10倍浓缩液1000ml配制方法:分别称取16.5g硝酸讓、19g硝酸钾、1.7g磷酸二氢钾、3・7g硫酸镁、4.4g氯化钙,用无菌水定容至1000ml；母液2：螯合铁

7、盐母液1000ml配制方法:分别称取5.57g硫酸亚铁、7.45g乙二胺四乙酸二钠，用无菌水定容至1000ml，配制1000mIMS培养基时,取5m1螯合铁盐母液；母液：3：微量元素1000倍浓缩液1000ml配制方法：分别称取g碘化钾、glfl酸钠、g硫酸铜、g氯化钻，用无菌水定容至1000ml；2母液4：有机物100倍浓缩液1000ml配制方法：分别称取g甘氨酸、维生素B1、呂维生索B6、g烟酸、g肌醇，用无菌水定容至1000ml；母液5：植物激素母液1000ml配制方法：分别称取0.2g生长索类似物2,4-D,0.15g细胞分裂索类似物KT,用蒸他水定容至1000ml,K制I

8、OOOiiiIMS培养基时，取10ml植物激素母液。2）利川母液配制固体培养基：（学生分组操作，每组配制500nilMS培养基，母液用量参照上一步）用托盘天平称取呂蔗糖和g琼脂，放入500ml锥形瓶屮，用量筒依次景取母液1ml.母液2ml.母液4ml、母液5ml,再用微量移液器（枪）取母液3ml均置于L1放入蔗糖和琼脂的锥形瓶川，用无菌水定容至500m1o最后，利用pH试纸检测培养基溶液的pH,用HC1或NaOH溶液将培养基pH调至5.&3）灭菌：（教师完成）2、外植体消毒：（学生分组操作）用于离体培养的植物器官或组织片段，叫做。1）流水冲洗：用流水冲洗老师提供的胡萝卜外植体，在冲

9、洗过程屮用牙刷轻轻刷洗，约2min；2）酒精消毒：用吸水纸吸T外植体表面的水分，放入体积分数的酒楮屮摇动次，持续s；酒粘消毒后立即将外植体取出，在中清洗；3）氯化汞消毒:清洗后用吸水纸吸干外植体表面的水分，放入质量分数为的氯化汞中1-加in；注意：氯化汞有毒，操作后应立即洗手，严防氯化汞入口！4）无菌水漂洗：取出后，在无菌水屮至少清洗次，漂净消毒液。将消毒后的外植体放入指定容器屮备用。3、接种：（学生分组操作）1）教师在接种前lOmin打开超净工作台紫外灯，对其进行灭