课题1 菊花的组织培养学案.doc

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1、课题1菊花的组织培养★课题重点：植物组织培养过程中使用的无菌技术★课题难点：植物组织培养过程中使用的无菌技术★教学方法：启发式教学★教学工具：多媒体课件★教学过程：1.基础知识知识冋顾：联系“植物细胞工程”，冋答下列问题：1.1具有某种生物全套的任何一个活细胞，都具有发育成完整个体的能力,即每个生物细胞都具有性。但在生物体的生长发育过程中并不表现出來，这是因为在条件下，通过基因的,构成不同组织和器官。1.2植物组织培养技术的应用有：实现优良品种的繁殖;培育作物；制作种子；培育作物新晶种以及细胞产物的工厂化心产等。活动1：阅读“植

2、物纽.织培养的基本过程”，讨论并完成以下问题：1.3细胞分化：个体发育中细胞在形态、结构和生理功能上出现差异的过程。K思考□细胞分化是一种持久性的变化，它有什么生理意义？使多细胞生物体中细胞结构和功能趋向专门化，有利于提高各种生理功能的效率。1.4愈伤纽.织是通过细胞分裂形成的,其细胞排列疏松1伯无规则,高度呈无沱彪状态的细胞。K思考22填表比较根尖分生纽•织和愈伤组织的异同：组织类型细胞来源细胞形态细胞结构细胞排列细胞去向根尖分生纽•织受精卵正方形无液泡紧密分化成多种细胞组织愈伤组织高度分化细胞无定形高度液泡化再分化成新个体相

3、同点都通过有丝分裂进行细胞增殖活动2：阅读“影响植物组织培养的条件”，讨论并完成以下问题:组织培养一般选择作材料。K思考3》i般來说，容易进行繁殖的植物容易进行纽•织培养。K思考4》选収生长旺盛嫩枝进行组培的原因是嫩枝生理状态好，容易诱导脱分化和再分化。1.7营养：常用的培养基是陋培养基，其中含有的大量元素是N、P、S、K、5、Mg,微量元素是Fe、Mi】、B、Zii、Cu、恥、Cl、Ni、I、Co,有机物有H•氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等。1.8激素：在培养基中需要添加和等植物激素，其浓度、使用的先麻顺序、用帚的比例等都影

4、响结果。K思考5》填表：激索使用的先后顺序及其用量比例对细胞分裂和分化的影响。使用顺序实验结果先生长素，后细胞分裂素有利于分裂但不分化先细胞分裂素，后生长素细胞既分裂也分化同时使用分化频率提高生长素/细胞分裂素比值与结果比值高时比值低吋比值适中促进愈伤组织生长1.9环境条件：、、等环境条件。菊花纽培所需PH为匚§,温度为°C,光照条件为每bj用日光灯照射12小时。2.实验设计活动3：阅读“制备MS固体培养基”,回答下列问题:212.1K制各种母液：将齐种成分按配方比例配制成的浓缩液。使用吋根据母液的浓缩信数，计算用量，并加蒸谓水

5、稀释。2.2配制培养基：应加入的物质有琼脂、鯉、大量元素、微量元素、有机物和植物激素的母液，并用蒸绸水定容到1000毫升。在菊花组织培养中，•可以不添加,原因是菊花茎段组织培养比较容易。2.3灭菌：采収的灭菌方法是o[思考6]MS培养基中各种营养物质的作用是什么？肉汤培养基相比，MS培养基有哪些特点？大杲元素和微量元素提供植物细胞所必需的无机盐;蔗糖提供碳源,维持细胞渗透压;甘氨酸、维生索等物质主要是为了满足离体植物细胞在止常代谢途径受到一定影响后所产生的特殊营养需求。微生物培养基以有机营养为主，MS培养基则需提供大昴无机营养。

6、活动4：阅读“外植体消毒”，填写下列流程图:旺盛■()刷洗，冲洗■（吸水纸）■（的酒精）嫩枝冲洗20分钟左右吸干表面水分摇动2-3次6-7秒()•(）溶液（吸水纸）•（）清洗清洗■浸泡1〜2分钟■吸干表面水分■［思考7］在此消毒过程中，是不是强度越大越好，为什么？不是。对外植体进行表面消毒时，既要考虑到药剂的消毒效果，又要考虑到植物的耐受力。3.发酵操作：活动5：阅读“接种、培养、移栽和栽培”，填写：3.1前期准备：用消毒工作台，点燃酒精灯。注意所有接种工作都必须在酒精灯旁进行，器械使用前后都要用灭菌。3.2接种操作:接种过程中

7、插入外植体时形态学端朝上，每个锥形瓶接种个外植休。K思考82外植休接种与细菌接种相似之处是操作步骤相同，血且都耍求无菌操作。3.3培养过程应该放在无菌箱中进行，并定期进行消毒,保持适宜的和=3.4移栽前应先打开培养瓶的封口膜,让其在培养间生长几日，然后用流水清洗根部培养基。然后将幼苗移植到消过毒的或等环境中生活一段时间,进行壮苗。最后进行露天栽培。［思考9］外植体在培养过程中可能会被污染，你认为造成污染的原因有哪些？外植体消毒不彻底；培养基灭菌不彻底；接种中被杂菌污染；锥形瓶密封性差等。（三）课堂总结、点评（四）实例探究例1H薯

8、种植多年后易积累病毒而导致晶种退化。目前生产上采用茎尖分生组织离体培养的方法快速繁殖脱毒的种苗，以保证该殆种的品质和产杲水平。这种通过分生组织离体培养获得种苗的过程不涉及细胞的（）A.有丝分裂B.分化C.减数分裂D.全能性例2植物细胞表现出全能性的必要条件是（）