菊花的组织培养导学案分析.doc

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1、课题1菊花的组织培养班级姓名【教学目标】1、熟悉植物组织培养的基本过程2、理解细胞分化的概念及离体植物细胞的脱分化和再分化一、基础知识(一)植物组织培养的基本过程1.细胞分化(1)概念:在个体发育中,相同细胞的后代在______、______、____________上发生稳定性差异的过程。(2)过程:如:受精卵增殖→生长→分化形成组织、器官、系统。(3)特点:①持久性:是一种持久性的变化,它发生在生物体的整个生命过程中,在______期达到最大限度。②稳定性:细胞分化是稳定的,一般是____________的。③全能性:已分化的细胞,仍具有发育成完整个体的潜能。(4)结果:形成不同的细胞

2、和组织。(5)原因:______________________________________________________的结果。2.细胞全能性(1)定义:生物体的细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能的特性。(2)原理:生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质,都有发育成为完整个体所必需的全部基因。(3)实例:已分化的植物细胞,仍具有全能性。高度特化的动物细胞,从整个细胞来说,全能性受到限制。但它的细胞核仍然保持着全能性,这是因为__________________。(4)全能性的比较:受精卵>胚胎干细胞>生殖细胞(卵细胞)>体细胞。3.植物组织培养(1)必要条件:①细胞

3、离体;②一定的营养物质、激素和其他外界条件。(2)原理:细胞的全能性(3)相关概念:①外植体:_________________________________________。②脱分化:由高度分化的植物组织或细胞____________的过程,称为植物细胞的脱分化,或者叫做去分化。③再分化:脱分化产生的愈伤组织继续进行培养,又可以重新分化成根或芽等器官,这个过程叫做再分化。④愈伤组织:__________________,是高度液泡化的、成无定形状态的薄壁细胞。(二)影响组织培养的因素1.外植体的选取不同植物的组织培养难度不同;同一种植物的不同组织培养难度不同。菊花的组织培养一般选择__

4、________________________________________。2.培养基的配制(MS培养基)3.不同植物激素浓度,使用顺序和使用量大量元素:N、P、K、Ca、Mg、S;微量元素:B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co有机物:甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等。植物激素:生长素、细胞分裂素、赤霉素等。使用顺序实验结果先生长素,后细胞分裂素先细胞分裂素,后生长素同时使用生长素细胞分裂素比值结果比值高时比值低时比值适中4.消毒:在培养的整个过程中,都需要是一个______环境。5.pH、温度、光照菊花:pH=_____;温度控制在____℃;每日用日光灯照射____h。二

5、、实验操作(一)MS固体培养基制备1.配置各种母液①无机物中大量元素浓缩______倍,微量元素浓缩______倍,常温保存。②激素类、维生素类以及用量较小的有机物一般可按1mg/ml的质量浓度单独配制成母液。③用母液配制培养基时,需要根据各种母液的浓缩倍数,计算用量。2.配制培养基①配制培养液;②调PH;③培养基的分装。分装到锥形瓶中,每瓶分装50ml或100ml。由于菊花的茎段的组织培养比较容易,因此不必添加植物激素。3.灭菌分装好的培养基连同其他器械一起进行灭菌。(二)外植体消毒1.选材:菊花茎段,取生长旺盛的嫩枝。2.消毒①流水冲洗:菊花茎段用流水冲洗后可少许,用软刷轻轻刷洗,刷洗

6、后在流水下冲洗20min左右。②酒精处理:用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分,放入体积分数为70%的酒精中摇动______次,持续______s,立即将外植体取出,在无菌水中清洗。③消毒液处理:取出后用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分,放入质量分数为0.1%的氯化汞溶液中1-2min,取出后在无菌水中至少清洗______次,漂净消毒液。课题1菊花的组织培养的第二课时班级姓名(三)接种1.接种室消毒污染的主要来源是空气中的细菌和孢子,接种室消毒是至关重要的。用70%的酒精喷雾使空气消毒,酒精擦拭工作台并用紫外线照射20分钟。2.无菌操作要求操作要在____________完成,每次使用器械后,都

7、需要__________________,接种后立即____________。3.材料的切取和接种4.接种注意事项①每接种一块外植体前,镊子需放入体积分数为75%的酒精溶液中消毒一次,然后在酒精灯火焰上烧一遍,冷却后再接种。②外植体在培养基中要分布均匀,放置外植体数量根据锥形瓶的大小确定,一般胡萝卜____________块,菊的茎或叶____________块,也不要太少,以充分利用培养基中的营养成分和光照条件。③插入

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