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时间:2017-12-20
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1、菊花的组织培养导学案一、学习目标1说明植物组织培养的基本原理。2学习植物组织培养的基本技术。3进行菊花或其他植物的组织培养。二、学习重点与难点重点:1植物组织培养的相关概念和过程2影响植物组织培养的因素3植物组织培养过程中使用的无菌技术。难点:1影响植物组织培养的因素。2植物组织培养过程中使用的无菌技术。三、学法指导:小组交流合作一对一检查通关四、自主学习一、植物组织培养的相关概念和基本过程1植物组织培养的相关概念(1)细胞分化:植物的个体发育过程中,细胞在__________、__________和__________
2、上都会出现稳定性的差异,形成这些差异的过程就叫做细胞分化。细胞分化是基因__________的结果。(2)细胞的全能性:__________的植物细胞仍然具有发育成为__________的潜能。细胞全能性是组织培养的基本原理。(3)愈伤组织:由离体的植物器官、组织或细胞在一定的培养条下经过__________过程形成的组织,就叫愈伤组织,愈伤组织的细胞排列疏松而无规则,是一种__________的呈无定形状态的__________。(4)脱分化:由__________的植物组织或细胞产生__________的过程,称为脱
3、分化,又叫去分化。()再分化:脱分化产生的愈伤组织继续进行培养,又可以重新分化成__________,这个过程叫做再分化。(6)外植体:用于离体培养的植物器官或组织片段。2植物组织培养的基本过程移植——→试管苗———→完整的植物体二、影响植物组织培养的因素1内部因素:不同的植物组织,培养的难易程度差别很大。同种植物材料,__________,__________等也会影响实验结果。菊花的组织培养,一般选择__________的茎上部新萌生的侧枝。2外部因素:(1)营养条常用的是__________培养基,其主要成分包括:
4、__________,如__________________________;__________,如______________________________;__________等。(2)植物激素植物激素中__________和__________是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性因素。____________________、____________________以及__________等,都会影响实验结果。(3)环境因素__________、__________、__________等条也能影响植物组织培
5、养。菊花组织培养,一般PH控制在__________;温度控制在__________;每天用日光灯照射__________小时。【思考】(1)生长素使用的先后顺序、用量比例不同分别会造成哪些影响?三、实验操作过程1制备S固体培养基实验室一般使用4℃保存的配制好的培养基母液制备(1)配制各种母液。配制母液时,大量元素浓缩__________,微量元素浓缩__________。常温保存。激素类、维生素类以及用量比较小的有机物可以按照1g/l的质量浓度单独配制母液。用母液配制培养基时,需要根据各种母液的浓缩倍数,计算用量。(2
6、)配制培养基。配制1LS培养基时,将称量好的琼脂加入800L蒸馏水,加热熔化,然后加入蔗糖30g,依次加入母液,定容至1000L。__________,然后分装到锥形瓶中,每瓶分装__________。(3)灭菌。高压蒸汽灭菌2、外植体消毒选取菊花茎段时,要取____________________。无菌技术包括培养基消毒灭菌和植物材料(外植体)的消毒灭菌。对培养材料进行表面灭菌时,一方面要考虑_______________;另一方面还要考虑植物材料的__________。不同药剂、不同植物材料,甚至不同器官要区别对待。
7、一般情况下,细菌污染可能是由接种人员造成的,真菌污染可能是_________灭菌不当。过程:流水冲洗→软刷刷洗→流水冲洗①过程流水冲洗→软刷刷洗→流水冲洗__________→无菌吸水纸吸干外植体表面→体积分数为__________的酒精中摇动2~3次,持续__________→无菌水清洗→无菌吸水纸吸干外植体表面→质量分数为01﹪的__________溶液中1~2in→无菌水中至少清洗3次3、接种接种前,用体积分数70%的酒精将工作台擦拭,然后点燃酒精灯。所有的接种操作必须在酒精灯旁进行,并且每次使用器械后,都要用火焰
8、灼烧灭菌
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