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1、生淀粉糖化酶论文：生淀粉糖化酶产生菌的选育与应用【中文摘要】根霉2是本实验室保存的一株产生淀粉糖化酶活力较高的菌株,本实验将根霉2产的生淀粉糖化酶应用于生料发酵,研究了37℃木薯生料发酵生成酒精的工艺。通过单因素试验和响应面优化,得到其最优发酵条件为：pH4.6、发酵时间68.9h、加酶量173.00U/g、料液比1：3.5、酵母接种量108/mL、尿素0.2%(w/v),在此条件下发酵,酒精度为9.95%(v/v),与预测值9.90%(v/v)相差不大。另外摇床发酵、添加糖化酶和添加α-淀粉酶对发酵没有明显的提高效
2、果。初步研究了木薯浓醪发酵酒精,采用料液比为1：2.5,发酵时间60h,酒精度达到最大12.89%(v/v)。以根霉2为出发菌株,筛选得到突变株UL16,其生淀粉糖化酶活力比出发菌株平均提高28.29%。同时研究了添加2-D-脱氧葡萄糖以筛选抗性突变株,得到突变株K7,酶活平均提高了25.44%。UL16和K7经传代试验,产酶稳定。对生淀粉糖化酶进行了硫酸铵初步分离纯化,并研究了生淀粉糖化酶的部分酶学性质。结果表明：最适反应温度为40℃；最适反应pH范围为4.0～4.8；50℃内较稳定,超过此温度酶活急剧下降；pH4
3、.8～9.0范围内较稳定,酶活力都能保持80%以上；金属离子Hg2+、Ni2+、Ag+和Fe3+对酶活有抑制作用,K+、Fe2+和Na+对酶活基本没有影响,Li+、Co2+、Zn2+、Cu2+、Mg2+、Pb2+、Ca2+和Mn2+对酶活有激活作用,其中Mn2+对酶活提高幅度最大,达到88.42%。【英文摘要】Rhizopussp.2storedinourlaboratorisastrainthatcanproducerawstarch-digestingglucoamylaseathighlevel.Inthise
4、xperiment,rawstarch-digestingglucoamylaseproducedbyRhizopussp.2wasappliedinethanolfermentation,andtheconditionsofethanolfermentationunder37℃usingrawcassavasrarchwithwasstudied.Bysinglefactorexperimentandresponsesurfaceanalysisoptimization,theoptimumfermentation
5、conditionswere:pH4.6,fermentationtime68.9h,enzyme173.00U/g,material/liquid1:3.5,yeastinoculumsize108/mL,urea0.2%(w/v).Fermentingundertheseconditions,thepredictivevalueofalcoholconcentrationwas9.90%(v/v),andtheactualalcoholconcentrationwas9.95%(v/v).Besides,shak
6、erfermentation、addingglucoamylaseandaddinga-amylasehadnosignificantimprovementonthealcoholfermentation.High-gravityfermentationofcassavaethanolfermentationwaspreliminarystudied，thematerialwaterratiowas1:3.5，whenfermentationtimewas60h,themaximumalcoholconcentrat
7、ionreached12.89%(v/v)UsingRhizopussp.2asthestartingstrain,mutantstrainUL16wasobtained,anditsrawstarch-digestingglucoamylaseactivityincreasedby28.29%averagethanthatofthestartingstrain.Atthesametime,resistantmutantstrainwasscreenedbyadding2-D-deoxyglucose,mutants
8、trainK7wasobtained,itsenzymeactivityrisedinanaverageof25.44%.TheenzymeproductionofUL16andK7wereverysteadythroughpassageexperiments.Rawstarch-digestingglucoamylasewasinitiall
