蒙脱石共固定化淀粉酶和糖化酶的研究.doc

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1、蒙脱石共固定化淀粉酶和糖化酶的研究摘要自20世纪60年代以来,固定化酶技术在食品与发酵工业、有机合成等领域得到了广泛的应用。而近年来酶的共固定化技术,既有固定化酶的高稳定性和连续操作能力,又具有酶之间的协同作用,显示出很强的优越性。本研究选择目前工业上应用比较广泛的蒙脱石为载体,采用吸附法共固定了α-淀粉酶和糖化酶双酶。实验所用的蒙脱石经提纯钠化后,用KH570对其进行偶联,然后用经以上处理的蒙脱石对双酶同时固定。并通过测定其活性和酶的吸附率分析实验结果,确定了共固定化的最适条件,研究了共固定化酶的性质,为工业应用提供了一定的理论依据。经本实验所确定的共固定最佳条件为淀粉酶(

2、U):糖化酶(U):蒙脱石(g)为15:7.5:0.2,pH为5.5,温度为20℃。在最佳固定条件下共固定化酶的性质为:最适反应温度为55℃左右;最适反应pH为5.5;稳定性在低温下较好,而在高温下不甚理想;共固定化酶在在0℃下保存10天后其相对酶活仍在50%以上,使用四次后其相对酶活仍有50%以上,故储藏性能和操作性能较好。关键词:共固定化,α-淀粉酶,糖化酶。Studiesonco-immobilizationofα-amylaseandglucoamylaseonmontmorilloniteAbstractSincetheadventoftheimmobilizede

3、nzymesinthe60soflastcentury,theimmobilizedenzymeshasbeenwidelyusedintheareasoffoodandfermentationindustryandorganicsynthesis.Theco-immobilizedenzymeshasbothhighstabilityandcontinuousoperationcapabilityandshowsastrongadvantage.Thisstudyhaschosenthemontmorillonitewhichwaswidelyusedintoday'sin

4、dustrialproductionasthecarrier,andfixedα-amylaseandglucoamylasedualenzymesystembyadsorption.Determinedtheoptimalconditionsofco-immobilizationandstudiedthenatureoftheco-immobilizedenzyme,providingatheoreticalbasisforindustrialapplications.Themontmorilloniteusedinthisexperimenthasbeenpurified

5、andNa-treated,andthenconjugatedbyonecouplingagentwhichnamedKH570inordertoimproveitsadsorptioncapacityoftheenzymes.Thenusingthemontmorillonitetofixtwo-enzyme.Determinedtheoptimalconditionsofco-immobilizationandstudiedthenatureoftheco-immobilizedenzyme,providingatheoreticalbasisforindustriala

6、pplications.Thepresentstudyidentifiedatotalofconstantoptimalconditionsforamylase(U):glucoamylase(U):montmorillonite(g)as15:7.5:0.2,pH5.5,temperature20℃.Inthebestconditionofthefixednatureofimmobilizedenzyme:optimaltemperaturewasaround55℃;optimalreactionpH5.5;stabilityatlowtemperatureswell,bu

7、tnotidealathightemperatures;Theco-immobilizedenzymewasstoredat0℃,after10daystherelativitywasstillabove50%,afterusingfourtimestherelativeactivitywasstillmorethan50%,sotheco-immobilizedenzyme,sstorageandoperationperformancewaswell.Keywords:co-immobilizatio

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