实验4叶绿素的提取、理化性质和含量测定.ppt

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1、实验中的注意事项：1、实验的取材2、操作及观察3、实验数据的处理4、实验结果的分析：分清错误和误差5、思考题6、实验报告Evaluationonly.CreatedwithAspose.Slidesfor.NET3.5ClientProfile5.2.0.0.Copyright2004-2011AsposePtyLtd.实验四叶绿素的提取、理化性质和含量测定（p130－136）一、叶绿素的提取二、叶绿素的理化性质三、叶绿素含量的测定Evaluationonly.CreatedwithAspose.Slidesfor.NET3.5ClientProfile5.2.0.0.

2、Copyright2004-2011AsposePtyLtd.1.实验目的1）掌握叶绿素的提取及其含量测定的方法2）了解叶绿素的理化性质Evaluationonly.CreatedwithAspose.Slidesfor.NET3.5ClientProfile5.2.0.0.Copyright2004-2011AsposePtyLtd.2.实验原理2.1用含水的有机溶剂提取叶绿素2.2叶绿素的物理性质吸收光谱荧光现象2.3叶绿素的化学性质取代反应皂化反应Evaluationonly.CreatedwithAspose.Slidesfor.NET3.5ClientProf

3、ile5.2.0.0.Copyright2004-2011AsposePtyLtd.2.1用含水的有机溶剂提取叶绿素亲水的卟啉环的“头部”:镁原子居于卟啉环的中央，带正电性，与其相联的氮原子则偏向于带负电性，因而卟啉具有极性，是亲水的，可以与蛋白质结合。亲脂的叶绿醇的“尾巴”:叶醇是由四个异戊二烯单位组成的双萜，是一个亲脂的脂肪链，它决定了叶绿素的脂溶性。Evaluationonly.CreatedwithAspose.Slidesfor.NET3.5ClientProfile5.2.0.0.Copyright2004-2011AsposePtyLtd.2.2叶绿素的物

4、理性质2.2.1吸收光谱2.2.2荧光现象2.2.3含量测定Evaluationonly.CreatedwithAspose.Slidesfor.NET3.5ClientProfile5.2.0.0.Copyright2004-2011AsposePtyLtd.2.2.1叶绿素的吸收光谱Evaluationonly.CreatedwithAspose.Slidesfor.NET3.5ClientProfile5.2.0.0.Copyright2004-2011AsposePtyLtd.2.2.2荧光现象透射光下反射光下叶绿体吸收光后，激发了捕光色素蛋白复合体（LHC），

5、LHC将其能量传递到PSII或PSI。其间所吸收的光能有所损失，大约3%-9%的所吸收的光能被重新发射出来，其波长较长,也即叶绿素荧光。叶绿素溶液在透射光下呈绿色，在反射光下呈红色的现象。Evaluationonly.CreatedwithAspose.Slidesfor.NET3.5ClientProfile5.2.0.0.Copyright2004-2011AsposePtyLtd.分子吸收的光能有一部分消耗于分子内部的振动上，发射的荧光的波长总是比被吸收光的波长要长叶绿素吸收红光后处于第一单线态，叶绿素分子要从第一单线态返回基态所发射的光称为荧光。Evaluati

6、ononly.CreatedwithAspose.Slidesfor.NET3.5ClientProfile5.2.0.0.Copyright2004-2011AsposePtyLtd.2.2.3含量测定叶绿素a、b在红光区的最大吸收峰分别位于663nm和645nm；叶绿素a、b在652nm处有相同的比吸收系数（34.5），测OD652求出叶绿素a、b总量。故叶绿素浓度C＝OD652/34.5(mg/ml)叶绿素的含量（mg/g）=[叶绿素的浓度×提取液体积×稀释倍数]/样品鲜重Evaluationonly.CreatedwithAspose.Slidesfor.NET

7、3.5ClientProfile5.2.0.0.Copyright2004-2011AsposePtyLtd.2.3叶绿素的化学性质2.3.1叶绿素的结构2.3.2取代反应2.3.3皂化反应Evaluationonly.CreatedwithAspose.Slidesfor.NET3.5ClientProfile5.2.0.0.Copyright2004-2011AsposePtyLtd.2.3.1叶绿素的结构叶绿素a与b很相似，不同之处仅在于Chla第二个吡咯环上的一个甲基(-CH3)被醛基(-CHO)所取代即Chlb。Evaluati