蕨麻多糖的提取、含量测定和理化性质分析

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1、JTCVM2006年第2期蕨麻多糖的提取、含量测定和理化性质分析12123王谢忠,胡庭俊,李晓明,陈炅然,郑荣梁(1.甘肃农业大学动物医学院,甘肃兰州730070;2.中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所;3.上海高校一氧化氮及炎症医学E-研究院)中图分类号:S85917文献标识码:A文章编号:1000-6354(2006)02-0034-02蕨麻(PotentillaanserineL.)又名戳玛、卓玛沙曾、延寿果2.2.2茚三酮反应取0.1%的PAP溶液1.0ml置试管和仙人果等,江南称其人参果,为蔷薇科植物委陵菜属鹅绒中,加0.1%的茚

2、三酮溶液0.5ml,混匀,煮沸1~3min,观察委陵菜的块根,多年生草本,广泛分布于我国甘肃、青海、宁颜色变化。以蒸馏水为阴性对照,0.5%的甘氨酸溶液为阳夏、西藏、山西等十多个省区。全草入药,春采性凉,秋采性性对照。结果表明,PAP的茚三酮反应呈阴性,说明PAP样温,有收敛止血、止咳利痰、治诸血及下痢、健脾益胃、生津止品中不含氨基酸或蛋白质。渴、益气补血等功用。蕨麻作为藏药历史悠久,历代有关蕨2.2.3Molish反应取0.1%的PAP溶液1.0ml,置试管麻的记载已有不少,但对其研究只涉及临床应用、某些药理中,加2%的α-萘酚乙醇溶液(

3、Molish试剂)200μl,将试管作用等。笔者等对蕨麻多糖(PAP)的提取、含量测定和理化倾斜,沿试管壁慢慢加浓硫酸1.0ml,后直立试管,观察浓硫性质进行了分析,现报道如下。酸与糖溶液交接面颜色的变化。以蒸馏水为阴性对照,1材料015%的淀粉指示液为阳性对照。结果表明,PAP的Molish实1.1仪器反应呈阳性,说明PAP样品中含糖。验索式提取器;岛津UV-3000紫外分光光度计;NEXUS2.2.4红外光谱分析取蕨麻多糖少许,KBr压片后于技-1红外分析仪。NEXUS红外分析仪上进行分析。红外光谱在4000~400cm术-11.2药材

4、区间内扫描,有多糖的特征吸收峰,在841cm的吸收峰说蕨麻,产自青海玉树地区。明PAP以α糖苷键连接(图1)。2方法与结果2.1蕨麻多糖的提取称取干燥蕨麻,置索式提取器中,加入石油醚(60~90℃)回流提取12h,脱脂,挥干溶媒后,取常水浸泡于蒸锅中,过夜,加12倍量的水,置电炉上煎煮1.5h,后将水溶液过滤,重复3次,将3次所得滤液合并,置蒸发皿中蒸发浓缩至1∶1。将浓缩液置烧杯中,加5倍量95%的乙醇,低温静置过夜。将沉淀物置离心管中离心(3000r/min,10min),弃上清,加入95%的乙醇充分搅拌后离心(3000r/min,10

5、min),弃上清,再依次分别加入无水乙醇、丙酮、乙醚充分洗涤后离心(3000r/min,10min),弃上清。将所得沉淀物置平皿中,待乙醚挥发完后所得灰色粉末即为蕨麻粗多糖,称重。图1PAP的红外光谱图得率为6.22%。2.3蕨麻多糖含量测定2.2蕨麻多糖的理化性质采用苯酚-硫酸法,以葡聚糖为标准,测定上述蕨麻粗2.2.1碘-碘化钾反应在白瓷板的凹孔中加入0.1%多糖的总糖含量。PAP200μl,再加入碘-碘化钾液50μl,观察颜色变化。以2.3.1制作标准曲线准确称取标准葡聚糖20mg于500ml蒸馏水为阴性对照,0.5%的淀粉指示液为阳

6、性对照。结果容量瓶中,加水溶解并稀释至刻度,分别吸取0.4、0.6、0.8、表明,PAP的碘-碘化钾反应呈阴性,说明PAP样品中不含110、1.2、1.4、1.6和1.8ml,置具塞试管中,各管加蒸馏水至淀粉。2.0ml,后加6%苯酚溶液1.0ml,再快速加入浓硫酸5.0ml,静置10min,摇匀,室温放置20min,后于490nm波长处测定收稿日期:2005-11-20光吸收度,以2.0ml蒸馏水按同样显色操作作为空白对照,以项目来源:国家自然科学基金项目资助(批准号:30371056);上海教葡聚糖微克数为横坐标,以光吸收度为纵坐标,绘

7、制标准曲委一氧化氮及炎症医学E-研究院(E-04010)资助作者简介:王谢忠(1980-)男,在读硕士,从事兽医病理学。通讯作线。结果对照品在16~48μg与光吸收度呈良好线性关系,回者:胡庭俊归方程为y=0.0137x+0.743(r=0.995)。34©1994-2010ChinaAcademicJournalElectronicPublishingHouse.Allrightsreserved.http://www.cnki.netJTCVM2006年第2期2.3.2样品含量测定准确称取蕨麻粗多糖4mg于100ml的参考价值。容量瓶中

8、,加水溶解并稀释至刻度,吸取1.0ml(相当于多糖参考文献:约40mg)置具塞试管中,按照标准曲线法测定光吸收度,重[1]纪耀华,刘志红,程力敏.芦荟多糖的提取与粗多糖中总复操作

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