蕨麻水溶性多糖的提取及其单糖组分的分析

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1、2仪刀年2月中央民族大学学报(自然科学版)Feb.2(X)7第16卷第1期Jouma1OftheCUN(NaturalsciencesEdition)Vul.16No.1蔗麻水溶性多糖的提取及其单糖组分的分析刘春兰，雷美康，邓义红，李转秀，曾明(中央民族大学生命与环境科学学院，北京1(XX)81)摘要:本文采用热水提取、乙醇沉淀、a-淀粉酶法脱淀粉、链酶蛋白酶和Sevag法联合除蛋白，得到蔗麻多糖.对提取的藏麻多搪进行了总糖含量及糖醛酸含量的测定.粗多糖(PI)总糖含量为41.8%，糖醛酸含量为11.1%‘脱淀粉脱蛋白多

2、搪(凡)总糖含量为39.4%，糖醛酸含量为35.9%.经纸层析和高效液相色谱分析，表明该多糖主要由阿拉伯糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖、半乳糖醛酸组成，说明蔗麻多糖为酸性杂多糖.关健词:藏麻;多糖;分离纯化;组成中图分类号:Q539文献标识码:A文章编号:1005一so36(2oo7)01一0016一03藏药蔗麻仔b￡entillaanserinaL.)是青藏高原的一种特有经济作物，为蔷薇科委陵菜属植物鹅绒委陵菜之膨大块根，又叫“人参果”，藏语名“戳玛”，藏医称“卓老酒曾”，属多年生草本植物.藏麻作为一种具有很高营养价值和医

3、疗保健功能的药食两用植物，有着广阔的开发前景〔’〕.现今，国内外的相关研究并不是很多，特别是针对蔗麻多糖.杨桦[2j等从蔗麻中分离出多糖成分，并测定了总糖含量.陈灵然[3一‘〕等进行了蔗麻多糖的药理学活性研究，但他们水提的粗多糖都未进行脱淀粉，也就是没有把营养性多糖与功能性多糖分离开.本文采用水提醇沉法从获麻中提取出了多糖组分，采用酶法脱去粗多糖中的淀粉，然后脱蛋白，得到蔗麻初步纯化多糖.然后对蔗麻多糖进行进一步的理化性质分析.这不仅填补了蔽麻在多糖分析方面的研究空白，而且可以为藏麻的应用开发提供可靠的理论依据.尤其是在

4、青藏高原地区，野生藏麻资源十分丰富，对其进行研究，不但可以实现其丰富的营养价值和珍贵的药用价值，而且可以给该地区带来可观的经济效益和社会效益，更会在开发西部资源的同时，提高我国功能食品的研究水平〔’〕.1实验部分1.1材料、试剂和仪器1.1.1材料:蔽麻(产地甘肃甘南，晒干粉碎备用)1.1.2主要试剂a一淀粉酶(生化试剂)，北京双旋微生物培养基制品厂;链蛋白酶(生化试剂)，FromstreptomycesGriseusRoche;标准糖为生化试剂，其他常用化学试剂均为分析纯.1.1.3主要仪器LD4一2型离心机、sooB

5、一离心机、JAZoo3型电子天平、TDA一恒温水浴锅、ZK一82A真空干燥箱、紫外一可见分光光度计(V一550)、高效液相色谱仪旧本岛津公司)、紫外灯(北京碧都空气净化设备公司).1.2粗多糖的提取及初步纯化1.2.1粗多糖提取流程:收稿日期2以巧一00一以作者简介刘春兰(1%2一)，女(汉族)，吉林人，中央民族大学生命与环境科学学院副教授.第1期刘春兰等:获麻水溶性多糖的提取及其单糖组分的分析蔗麻块根(粉碎)1.2.1粗多糖初步纯化流程如右图示:{“”‘脱，旨1.3蔗麻多精理化性质研究脱脂残渣1·3.1硫酸一苯酚法测定

6、多糖含量囚1.3.2硫酸一咔哇法测定糖醛酸含量[5l醇提残渣1·3.3多糖的纸层析〔6」样品(脱淀粉及蛋白)的完全酸水解液.展开热水浸提(边欠)剂为正丁醇:冰醋酸:水二4:1:5(v/v)，展层时间26h，待纸上的溶剂干燥后，喷洒显色剂(邻苯二甲酸苯胺)，在100℃下显色10而n.厂过滤—几1.3.4多糖的高效液相色谱分析闭残渣滤液蔗麻多糖(脱淀粉及蛋白)酸水解液过孔径浓缩为0.46nun的滤膜，进样量为20川.条件:氨基柱(Hypersit一NHZ:巧Olnlnx4.61llln醇沉xsum)流动相:乙氰:水=80:2

7、0流速:1，Zrnllrnln。离心粗多糖上清液2结果与讨论旅麻粗多糖2.1蔗麻粗多糖分析2.1.1粗多糖性质一K卜‘2分析淀粉检测威麻水提醇沉得粗多糖，粗多糖得率为4.1%.孩麻粗多糖是一种褐色粉末状固体，无味，溶于水，不溶于乙醇，丙{Q一淀粉酶脱淀粉酮，氯仿等有机溶剂.Kl一1:实验有蓝色现象，说明藏麻粗多糖含有淀粉.苯酚一硫酸反应产生橘红色缩合产物，说明蔗麻水溶性多糖含有糖.一微量凯式定氮法测定蛋白质含量硫酸一咔哇反应生成紫红色化合物，可以鉴别蔗麻粗多糖含有糖醛酸，说明藏麻多糖为酸性多糖.{酶法和Se一9‘联合脱蛋

8、白2.1.3苯酚一硫酸法测总糖含量经测定蔽麻多糖溶液在490nm处有最大吸光度，结果见图1.03n苯酚一硫酸法测定蔽麻粗多糖含量，回归曲线方︸02写程为y=0.ol3lx+0.ol63R，=0.9565标准曲线如图2.︸020得藏麻粗多糖总糖含量为41.8%.阅0J咤2.1.4硫酸一咔哇法测半乳糖醛酸含量纂J硫酸一咔