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时间:2020-03-23
《鸭胚成纤维细胞分离培养.ppt》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、实验一鸭胚成纤维细胞的分离培养实验指导:陈思怀、高继业一、实验目的了解细胞培养的准备工作掌握原代细胞的分离培养基本技能二、实验原理:应用相关蛋白酶离散组织细胞,按细胞体外生长所需环境进行培养三、实验用品实验用液:0.25%胰蛋白酶、DMEM培养液、PBS(-)实验器材:CO2培养箱、超净工作台、倒置显微镜、水浴锅、低速离心机、烧杯、漏斗、眼科剪/镊、刻度(无)吸管、纱布动物取材:9-11日龄鸭胚四、实验步骤:取出鸭胚,PBS清洗2遍去除鸭胚头、尾、四肢、内脏,剩下部分清洗2遍在青霉素瓶中剪碎,PBS清洗2遍加预热的胰蛋白酶消化8-1
2、0min弃胰蛋白酶,加3-5ml培养液,用滴管轻吹打数次用四层纱布过滤,制作细胞悬液细胞粗略记数,接种培养瓶五、实验预期结果48h后观察细胞生长情况、细胞形态并细胞拍照六、注意事项整个过程无菌操作组织的消化时间不能太长细胞吹打要轻柔接种密度要合适七、完成实验报告1、格式要求2、同组间实验结果可相同,但分析讨论不同八、教师的操作示范
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